"RM-1 Cell|小鼠前列腺癌细胞
细胞背景资料:前列腺癌;C57BL/6
细胞形态:上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良HAO(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞生长:贴壁
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细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RM-1 Cell|小鼠前列腺癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养试剂也依据不同细胞类型来选择:细胞培养试剂的种类很多并且不同试剂与不同细胞能产生的反应效果也不一样。因此选择试剂时要有针对性的根据细胞源进行匹配,才能起到良HAO的试验效果并能保障顺利完成实验。选择了相互匹配性HAO的细胞培养试剂不但有利于科研人员的研发分析,还可以提GAO培养的效率并保障达到培养的成功率。总而言之,对于选择细胞培养试剂来说需要根据实验的要求来进行合理的挑选匹配,只有采用了匹配度效果理想的试剂才能保障能顺利的通过实验,并避免对各种试剂材料及时间造成浪费。而且还要选择口碑HAO的细胞培养试剂才能保障材料的YOU质性,并能达到成功配置试剂的目的有效完成不同细胞培养计划。
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关键字: RM-1 Cell|小鼠前列腺癌细胞;
上海冠导生物工程有限公司,先后从ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等国内外细胞库引进细胞2000余株。以此为契机,公司组建了冠导细胞库,我司细胞均由资深细胞培养工程师进行培养。我司可以提供的细胞有:①细胞系②原代细胞③稳转株④耐药株⑤标记细胞⑥细胞配套试剂等。