G418,是一种与庆大霉素相关的氨基糖苷类抗生素,常用作真核细胞的筛选。作为硫酸新霉素的类似物,G418在真核细胞中干扰80S核糖体的功能以及蛋白质的合成。
显性作用的抗性基因(neor)的表达可筛选包含转座子Tn601(903)或Tn5的哺乳动物表达载体。当表达抗性的哺乳动物细胞在含有G418的培养基中生长时,约10-14天内产生稳定的菌落。
产品性质
形态:白色粉末
融点:138~144℃
溶解性:溶于水、甲醇
CAS:108321-42-2
分子式 : C20H40N4O10·2H2SO4
分子量 :692.71
比旋: 104-121℃
水分: ≤10%
吸光值: ≤0.015 (280nm,1mg/ml), ≤0.1 (570nm, 100mg/ml)
储运:室温下运输, 干粉在室温下储存,溶于水、甲醇,溶液于-20℃储存。
质量优势
1、提供纯度>90%(HPLC)的产品,与其他低浓度G418产品相比,使用量更低,更有利于细胞生长
2、效价>700ug/mg
3、严格控制ED50值,保证各批次的一致性
使用方法
由于各真核细胞系对G418敏感度不同,需通过实验确认各新细胞系或细胞株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量。
最适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml,每孔100ul加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度稀释至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ug/ml等12个级别, 培养10-14天,以最低细胞全部死亡浓度为基准,一般400-800ug/ml左右,筛选时比该浓度再高一个级别,维持时使用筛选浓度的一半即可。
浓度范围参考
关键字: 108321-42-2;
河南阿尔法化工有限公司是集开发、生产、销售为一体的高科技化学试剂公司,提供通用试剂的分销、非通用试剂的订制和开发等技术服务。公司拥有一批长期从事精细化学品开发和生产的高级技术人员,以及设备齐全的研发实验室和中试车间。产品被广泛应用于中科院各下辖研究单位,全国各著名院校,科研机构,化工企业且受到用户的一致好评。