NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞

"NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞

细胞背景资料：肾；成纤维细胞；自发永生

细胞形态：成纤维细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

NS1细胞类似产品：：H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞

T-ALL-1细胞类似产品：：NCI-H716细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、VP229细胞

B16-F0细胞类似产品：：Hs737T细胞、RK 13细胞、H1155细胞

CL MC/9细胞类似产品：：HFL 1细胞、NK92细胞、UCLA-SO-M20细胞

NS1-Ag 4/1细胞类似产品：：Karpas299细胞、786-O细胞、COLO-1细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

CHL-1细胞类似产品：：NCI-128细胞、HEK/EBNA细胞、MGH-U1细胞

HTori 3细胞类似产品：：P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞

HARA-B细胞类似产品：：HUCCT1细胞、MARC145细胞、DR2R1610细胞

LS 180细胞类似产品：：HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

细胞培养中的污染分为两类，化学污染和生物污染；生物污染包括比较容易发现的细菌、霉菌和酵母的污染，和较难发现的病毒、支原体和其他细胞的污染。细菌、霉菌和酵母到处存在，它们能在合适的环境中非常快速的生长。这些污染比较容易观察到，它们往往会使其污染的培养液产生可见的变化，或者通过显微镜观察就可以看见。由于病毒有种属异性，所以病毒污染的概率比较小。但是病毒污染难于发现，因为病毒颗粒别微小，一般的实验室都没能力检查细胞培养中污染的病毒。由于病毒一般潜伏在细胞内，对整个细胞培养不是致死的，所以它可能会使研究人员长期得到受病毒影响的细胞的实验结果。1956年Robinson及其同事首次发现细胞培养中的支原体污染。90年代初的一个调查发现，在美国培养的细胞中，至少有15%被支原体污染。由于支原体没有细胞壁，在细胞培养液中几乎是透明的，同时对常用于细胞培养中的抗生素不敏感，不引起pH变化，不使培养液浑浊，所以支原体污染不容易被发现，但是其存在会影响实验的结果。培养多种细胞时操作不当，会导致细胞的交叉污染。由于不同细胞的生产速率不同，污染的生长速率快的细胞终会完全取代被污染的细胞。

FRTL-5细胞类似产品：：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞

ketr 3细胞类似产品：：HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞

Y79细胞类似产品：：CHL-1细胞、MAVER细胞、NCI-H211细胞

TE-14细胞类似产品：：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞

TCCPAN2细胞类似产品：：HLEC细胞、QGP-1细胞、OP9细胞

H1882细胞类似产品：：HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞

Reuber-H-35 hepatoma细胞类似产品：：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞

RA 1细胞类似产品：：NCTC 1469细胞、A549 ATCC细胞、A-704细胞

HEK-293 c18细胞类似产品：：brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞

U-2OS细胞类似产品：：RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞

NRK-49F Cell|大鼠正常肾成纤维细胞

RPTEC TERT1细胞类似产品：：786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞

H250细胞类似产品：：VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞

MO59J细胞类似产品：：PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞

MV4;11细胞类似产品：：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞

YT细胞类似产品：：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞

Kuramochi细胞类似产品：：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞

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HEK-293H细胞类似产品：：SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞

KAT-5细胞类似产品：：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞

U343MG细胞类似产品：：JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞

NCI-SNU-475细胞类似产品：：PANC-02-03细胞、Madison细胞、BHP-10细胞

HuT 102细胞类似产品：：CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞

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WEHI-231细胞类似产品：：NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞

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Tokyo Medical and Dental university 8细胞类似产品：：CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞

A375-S2细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、SU-DHL-16细胞、C8166细胞

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L细胞类似产品：：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞

Rat Basophilic Leukemia-1细胞类似产品：：Sp2/O-Ag14细胞、PG-LH7细胞、CAL-27细胞

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NCI-SNU-C2A细胞类似产品：：SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞

MO59J细胞类似产品：：PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞

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NOZAWA细胞类似产品：：ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞

ACC3细胞类似产品：：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞

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