NCI-H1436人小细胞肺癌复苏细胞(附STR鉴定报告)

"NCI-H1436人小细胞肺癌复苏细胞(附STR鉴定报告)

细胞生长：贴壁

细胞传代方法：随细胞的密度而增加

细胞培养中的污染分为两类，化学污染和生物污染。化学污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质。这些污染一般来自于没有洗净的器皿、不纯的化学试剂和质量较差的蒸馏水等。化学污染中比较引人注意的是细菌内毒素。它是革兰氏阴性细菌细胞死亡后解体释放出的疏水性的细胞壁组成物质，对塑料等疏水性强的物质有很强的吸附能力。细菌内毒素可刺激部分细胞产生一些激素或细胞因子，对细胞生长和实验结果产生影响。细菌内毒素是临床上的主要的热原（即注射到动物体内会导致动物发热），所以通过细胞培养生产的疫苗、细胞因子等用在临床上的药品的生产过程中更是要避免细菌内毒素的污染。

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

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在使用胰酶细胞消化液的过程中要别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化：吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清；加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟（不同的细胞消化时间有所不同）；显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用枪吹打细胞发现细胞刚HAO可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，改变细胞间的连接，使组织或细胞片分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

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[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

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细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

传代细胞时，使用无菌技术和合适的试剂及设备尤为重要。针对您的细胞系选择合适的培养液来得到佳的生长和扩增很关键。每一个细胞系都有定的生长营养组分配方，但是大多数细胞系起码需要的添加物有以下这些：血清，如胎牛血清，需热处理灭活其胎牛成分，它为细胞生长提供重要的生长因子。抗生素，如青霉素和链霉素用于防止细胞污染。其他的生长因子，如成纤维细胞生长因子，有助于延长细胞系的生长和扩增。不使用时，要将这些添加物或者“完全”细胞培养液保存于4摄氏度。首先要注意细胞培养液的颜色，富含营养的新鲜培养液由于添加了pH指示剂酚红故为透明橙色。当细胞耗尽培养液中的营养成分时，开始在培养物中积累废物和酸性物质，降低pH值。因此，许多细胞培养液含有酚红，当培养物呈酸性时会将培养液颜色由橙色变为黄色。培养液需在变黄之前更换。当酚红变为粉红色时，说明培养基pH偏碱，不利于细胞健康生长。这时可能需要改变二氧化碳浓度并更换培养液。很多贴壁细胞系可天然附着于无涂层的塑料上。因此，塑料细胞培养板如培养皿或六孔板经常用于传代细胞。塑料的细胞培养瓶也经常用到，如T25的细胞培养瓶，常用于扩增培养数目少的细胞或者开始培养生长缓慢的细胞系。T75细胞培养瓶常用在培养扩增速度较快的细胞系或用于生长超过T25培养瓶容量的大量细胞。在转移贴壁细胞时，要先剪切掉细胞上与和塑料结合的蛋白。因此，消化酶胰酶常用于消化细胞。控制胰酶消化的时间很重要，因为如果处理时间过长会损坏细胞表面的蛋白。细胞培养液能中和胰酶。所以在胰酶消化前常用磷酸缓冲液或PBS洗涤细胞。EDTA，一种钙螯合剂有时候也用于提GAO胰酶的蛋白水解功能。为扩增细胞克隆，将新鲜传代的细胞培养于细胞培养箱中，选择适合该细胞生长条件，通常为温度37度，二氧化碳5％和湿度95%。

细胞生长特性：悬浮生长

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