P815小鼠肥大细胞瘤复苏细胞(附STR鉴定报告)

"P815小鼠肥大细胞瘤复苏细胞(附STR鉴定报告)

细胞生长：贴壁

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

悬浮细胞成簇，可能原因：培养液中含钙、镁离子；支原体污染；蛋白酶过度消化使得细胞裂解；DNA污染；解决方法：用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞，轻巧吹吸细胞获得单细胞悬液；分离培养物，检测支原体；用DNaseI处理细胞；培养细胞生长缓慢；可能原因：由于更换不同培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；接种细胞起始浓度太低；细胞已老化；支原体污染；解决方法：比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验，让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配置培养液，或补加谷氨酰胺及生长因子；用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物；血清需保存在-10到-20℃。培养液需在2-8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，需在1周内用完；增加接种细胞起始浓度；换用新的保种细胞；分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

P815小鼠肥大细胞瘤复苏细胞(附STR鉴定报告)

在使用胰酶细胞消化液的过程中要别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化：吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清；加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟（不同的细胞消化时间有所不同）；显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用枪吹打细胞发现细胞刚HAO可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，改变细胞间的连接，使组织或细胞片分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

细胞背景资料：肥大细胞瘤；雄性；DBA/２

细胞形态：上皮细胞样

P815小鼠肥大细胞瘤复苏细胞(附STR鉴定报告)

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

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细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

细胞是生物体结构和功能的基本单位。动物细胞：指从人体或动物体内取出组织，经过机械或酶学的方法分离出单个的细胞，是动物细胞，简称细胞。动物细胞培养：泛指体外培养，指从动物活体体内取出组织，模拟体内生理环境等定的体外条件下，进行孵育培养，使之生存并增殖。原代细胞：指从机体取出后立即培养的细胞。严格的说是稳定传代前的培养，实际上，通常把从机体取出后10代以内的细胞，统称为原代细胞。细胞系：原代培养物经首次传代后可连续传代的细胞群体，是细胞系。细胞传代：细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶的过程称之为传代。永生化细胞（无限细胞系）：指获得不死性具有持久或无限增殖的能力，也指有限细胞系通过转染、转化、癌变或病毒感染而诱导产生。有限细胞系：在体外培养生存期有限，不能长期传代的细胞系。细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有殊性质或标志物的培养物称为细胞株（细胞株是由一个细胞增殖而来）。

细胞生长特性：悬浮

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