CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)

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细胞生长：贴壁

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞内空泡通常是细胞受到压力的表现，原因可能是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌剂、不适当的CO2环境对培养基中碳酸氢钠浓度或培养基的营养消耗殆尽。一般来说，对于某些细胞系，尤其是向3T3-L1这样具有脂滴的细胞，细胞包含空泡是正常的。缺氧：当缺氧时 细胞na泵动力不足导致细胞内水储留，Na泵动力不足导致其不能向细胞外运送足量的Na，从而使细胞内处于GAO渗透压状态，更多胞外水分子进入胞内，造成水储留。可以理解为因为水分的流失，细胞内出现细胞质的浓缩，从而出现空泡。原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况，是有些细胞处于终末分化状态，不会再分裂，时间长了就会空泡化而死亡。传代细胞出现这种状况比较少见，可能的原因是细胞代龄较长，老化严重。传代次数太多，细胞老化会出现上述的情况，但是还不排除其他因素，胞质中出现颗粒、脂滴或空泡也可能是细胞代谢不良的反应。我前一段时间养成纤维细胞（原代）的时候也出现过类似的情况。可以将血清的浓度提GAO10％到15％到20％；血清的质量，如果是国内的血清的话不同的批次之间的差异很大，可以借用些质量HAO的血清试试，看细胞状态是否会改变；把细胞消化收集起来，然后离心后重悬，重新种植。培养基里添加谷氨酰氨；细胞代谢障碍的问题，传代的次数可能不是关键因素,应该可以调整得过来；PH值不对，就用PH值试纸测了一下，大概6.7左右，加碳酸氢钠调到7.2左右,过了一段就HAO了。不排除轻度污染的可能，重度污染会伴有培养液的浑浊；培养液的PH值与细胞正常所需PH值差别太大；还有一个大家易忽略的问题，我们从相关权威资料中查到如果消化细胞吹打时力度过大，产生太多气泡，长期存在也会出现这种现象。

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞类似产品：：A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞

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JeKo 1细胞类似产品：：HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)

养细胞真的不难，关键几点：所有的东西使用的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏。动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因。有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措。要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，细胞房的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验。个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢。细胞房不能进去太多人，避免相互干扰。

细胞背景资料：结肠；成纤维细胞；女性

细胞形态：成纤维细胞样

CCD-18Co正常人结肠成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

Wien 133细胞类似产品：：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞

SW-756细胞类似产品：：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞

CCRF/CEM细胞类似产品：：M-1细胞、PL 5细胞、DHBE细胞

Hs606T细胞类似产品：：FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞

A.704细胞类似产品：：HEK293-EBNA细胞、16HBE140细胞、HSC-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

传代细胞时，使用无菌技术和合适的试剂及设备尤为重要。针对您的细胞系选择合适的培养液来得到佳的生长和扩增很关键。每一个细胞系都有定的生长营养组分配方，但是大多数细胞系起码需要的添加物有以下这些：血清，如胎牛血清，需热处理灭活其胎牛成分，它为细胞生长提供重要的生长因子。抗生素，如青霉素和链霉素用于防止细胞污染。其他的生长因子，如成纤维细胞生长因子，有助于延长细胞系的生长和扩增。不使用时，要将这些添加物或者“完全”细胞培养液保存于4摄氏度。首先要注意细胞培养液的颜色，富含营养的新鲜培养液由于添加了pH指示剂酚红故为透明橙色。当细胞耗尽培养液中的营养成分时，开始在培养物中积累废物和酸性物质，降低pH值。因此，许多细胞培养液含有酚红，当培养物呈酸性时会将培养液颜色由橙色变为黄色。培养液需在变黄之前更换。当酚红变为粉红色时，说明培养基pH偏碱，不利于细胞健康生长。这时可能需要改变二氧化碳浓度并更换培养液。很多贴壁细胞系可天然附着于无涂层的塑料上。因此，塑料细胞培养板如培养皿或六孔板经常用于传代细胞。塑料的细胞培养瓶也经常用到，如T25的细胞培养瓶，常用于扩增培养数目少的细胞或者开始培养生长缓慢的细胞系。T75细胞培养瓶常用在培养扩增速度较快的细胞系或用于生长超过T25培养瓶容量的大量细胞。在转移贴壁细胞时，要先剪切掉细胞上与和塑料结合的蛋白。因此，消化酶胰酶常用于消化细胞。控制胰酶消化的时间很重要，因为如果处理时间过长会损坏细胞表面的蛋白。细胞培养液能中和胰酶。所以在胰酶消化前常用磷酸缓冲液或PBS洗涤细胞。EDTA，一种钙螯合剂有时候也用于提GAO胰酶的蛋白水解功能。为扩增细胞克隆，将新鲜传代的细胞培养于细胞培养箱中，选择适合该细胞生长条件，通常为温度37度，二氧化碳5％和湿度95%。

细胞生长特性：贴壁

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