Hs 274.T Cells

"Hs 274.T Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

CAMA-1细胞类似产品：：Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞

NPC-TW01细胞类似产品：：Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞

MC3T3细胞类似产品：：P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞

SUM 190细胞类似产品：：SV-HUC-1细胞、SH-SY5Y Parental细胞、HPAF-II/CD18细胞

SK-N-BE(2C)细胞类似产品：：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞

Hs 274.T Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２传代,每周换液２-３次。

NCIN87细胞类似产品：：H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞

NCI-SNU-1040细胞类似产品：：DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞

HSC-1细胞类似产品：：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞

Hep G2细胞类似产品：：SKLU1细胞、NCI-H187细胞、C8166-CD4细胞

GC9811-P细胞类似产品：：Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

Hs 274.T Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

HBVSMC细胞类似产品：：CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞

H3396细胞类似产品：：NCI-H1693细胞、KYSE 410细胞、WSU-DLCL(2)细胞

UM-UC-3细胞类似产品：：16HBEo-细胞、A704细胞、AN3CA细胞

MSB1细胞类似产品：：LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞

Oregon J-111细胞类似产品：：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞

Hs706T细胞类似产品：：SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

SCL-1细胞类似产品：：MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞

RPMI7951细胞类似产品：：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞

SUDHL-4细胞类似产品：：NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞

D-324 Med细胞类似产品：：NCI-SNU-182细胞、HCT-116细胞、H2066细胞

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P-2003细胞类似产品：：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞

HEL 299细胞类似产品：：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞

LC1-Sq细胞类似产品：：SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞

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KYSE-140细胞类似产品：：MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞

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GM04678细胞类似产品：：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞

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Lu-99A细胞类似产品：：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞

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2780细胞类似产品：：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞

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GM03571细胞类似产品：：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞

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细胞、Hs 888Lu细胞

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Med 341细胞类似产品：：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞

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LK2细胞类似产品：：H3396细胞、PaTu 8988 S细胞、PC-3M 2B4细胞

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BLO-11细胞类似产品：：3T3-Swiss细胞、MCF 7B细胞、16HBE细胞

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