A-704 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肾癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

NCIH1693细胞类似产品：：C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞

JeKo-1细胞类似产品：：UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞

NCI-H187细胞类似产品：：RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞

Rat Lung-65细胞类似产品：：M-07e细胞、OCI Ly3细胞、Mv.1.Lu细胞

Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品：：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：３—１：４传代，每周换液２-３次

SUM-52PE细胞类似产品：：GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞

Hs839T细胞类似产品：：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞

U138-MG细胞类似产品：：HN-6细胞、ST-2细胞、BIU87细胞

KPL1细胞类似产品：：HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞

NCI-H810细胞类似产品：：ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

OCI-Ly 18细胞类似产品：：8305C细胞、F81细胞、P-3J细胞

TE-8细胞类似产品：：Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞

NCI-SNU-182细胞类似产品：：HIC细胞、WEHI-231细胞、PNT1/A细胞

HEC251细胞类似产品：：CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞

R3/1细胞类似产品：：JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞

MiaPaCa-2细胞类似产品：：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

MV522细胞类似产品：：PANC-28细胞、MCF-10A细胞、JROECL 33细胞

COLO 320 HSR细胞类似产品：：DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞

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H-2081细胞类似产品：：PK 15细胞、NuTu-19细胞、HCC-1569细胞

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WM-115细胞类似产品：：NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞

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NE-4C细胞类似产品：：PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞

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DMS 114细胞类似产品：：MDAMB175VII细胞、BrCL12细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞

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SKOV-3细胞类似产品：：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞

D341MD细胞类似产品：：SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞

Bowes melanoma cells细胞类似产品：：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞

OCI Ly19细胞类似产品：：H-3255细胞、MDA-kb2细胞、HUTU80细胞

Lec1细胞类似产品：：ChaGo-K-1细胞、CCD-112 CoN细胞、253J-Bladder-V细胞

HBE 135-E6E7细胞类似产品：：SaOS细胞、Caco-2 BBe细胞、5637细胞

AML-2细胞类似产品：：A2780S细胞、FRTL 5细胞、Kelly细胞

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