KNS-62 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺支气管鳞状细胞癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

MDA-MB-175细胞类似产品：：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞类似产品：：EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞

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A-431细胞类似产品：：RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞

KNS-62 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺支气管鳞状细胞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：每周换液２次。

HBL-100细胞类似产品：：NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞

Det. 562细胞类似产品：：H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞

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Centre Antoine Lacassagne-33细胞类似产品：：Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞

G-292, clone A141B1细胞类似产品：：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

KNS-62 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺支气管鳞状细胞癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

MIA PaCa-2细胞类似产品：：NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞

Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞

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MKN 45细胞类似产品：：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞

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细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。

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SKNBE(1)细胞类似产品：：WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞

2V6.11细胞类似产品：：IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞

CLONE M3细胞类似产品：：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞

P3-X63Ag8细胞类似产品：：HCC 2185细胞、Reuber H35细胞、H460细胞

SKLMS1细胞类似产品：：SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞

FTC-133细胞类似产品：：SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞

SK-BR-3细胞类似产品：：KMS11细胞、CAMA-1细胞、OVCAR 432细胞

SNB19细胞类似产品：：TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞

TPC-1细胞类似产品：：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞

NCIH1836细胞类似产品：：WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞

SuDHL 10细胞类似产品：：Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞

COLO 320DM细胞类似产品：：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞

P30/Ohkubo细胞类似产品：：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞

NCI-H1975细胞类似产品：：LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞

HCC-1500细胞类似产品：：SKMES1细胞、MC116细胞、V79-4细胞

COLO-394细胞类似产品：：H810细胞、TCMK-1细胞、OCI AML2细胞

H-1734细胞类似产品：：JM-1细胞、CTLA4Ig-24细胞、CAL78细胞

ARH-77细胞类似产品：：JJN3细胞、V79-GalK1细胞、NCI-H661细胞

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