NCI-H69 Cells(赠送Str鉴定报告)|人小细胞肺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

Co 115细胞类似产品：：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞

HEL-92.1.7细胞类似产品：：H-35 Reuber细胞、SW620细胞、H-1836细胞

H719细胞类似产品：：CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞

Jurkat Clone E6-1细胞类似产品：：CNE2Z细胞、D-324MED细胞、RIN-m细胞

CHO cell clone K1细胞类似产品：：HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：２—１：４传代，每周换液２次

C8D1A细胞类似产品：：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞

MCF.7细胞类似产品：：SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞

HT1197细胞类似产品：：190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞

L-540细胞类似产品：：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞

L 428细胞类似产品：：SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：悬浮生长，聚团

End1/E6E7细胞类似产品：：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞

VA-ES-BJ细胞类似产品：：SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞

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PAa细胞类似产品：：ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞

HS-294细胞类似产品：：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

3-LL细胞类似产品：：CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞

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AtT 20细胞类似产品：：HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞

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HEK 293细胞类似产品：：WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞

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HEC-1A细胞类似产品：：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞

HLF-a细胞类似产品：：TW01细胞、MDAMB330细胞、COLO.205细胞

COS7细胞类似产品：：BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞

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SNGM细胞类似产品：：H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞

WM 239-A细胞类似产品：：BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞

H2198细胞类似产品：：Malme3M细胞、NK10a细胞、TB-1 Lu细胞

NCI H929细胞类似产品：：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞

H460细胞类似产品：：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞

SNT8细胞类似产品：：CCD33Co细胞、OCI-LY-10细胞、HP615细胞

CEM-CCRF细胞类似产品：：PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞

AD-293细胞类似产品：：C4-2 Bone metastatic细胞、KB细胞、SKNF1细胞

NCI-H2052细胞类似产品：：KYSE 180细胞、JROECL21细胞、Mel-MeWo细胞

UC-3细胞类似产品：：HCFB（HCF）细胞、Human Kidney-2细胞、Hs 895.T细胞

B16F0细胞类似产品：：Madison 109细胞、AgC11x3A细胞、Human Epithelioma-2细胞

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