KP-N-YN Cells(赠送Str鉴定报告)|人平滑肌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

HemECs细胞类似产品：：Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞

B5537SKIN细胞类似产品：：MLTC-1细胞、HT 29细胞、OVCAR-3细胞

COLO320/DM细胞类似产品：：Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞

MEF (CF-1)细胞类似产品：：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞

Panc 03.27细胞类似产品：：Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２传代

HEL-92细胞类似产品：：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞

Epithelioma Papulosum Cyprini细胞类似产品：：EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞

COLO678细胞类似产品：：P30 OHK细胞、PANC403细胞、H9细胞

CV 1细胞类似产品：：hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞

G402细胞类似产品：：MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

KMS26细胞类似产品：：Kuramochi细胞、NCI-441细胞、3T3 Swiss Albino细胞

MDAMB175细胞类似产品：：FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞

CNE2细胞类似产品：：WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞

MV-522细胞类似产品：：SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞

NCIH1648细胞类似产品：：NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞

RBL.2H3细胞类似产品：：BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞

培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。

贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。

NTERA2细胞类似产品：：NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞

Colo-206F细胞类似产品：：Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞、V-79细胞、NCI-H1930细胞

L cells细胞类似产品：：HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞

Kato-III细胞类似产品：：Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞

SHEP1细胞类似产品：：SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞

Hep 3B2.1-7细胞类似产品：：MDAMB134细胞、LAPC4细胞、BT-325细胞

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Mc Ardle 7777细胞类似产品：：PLC-PRF-5细胞、MBMEC细胞、SUDHL-6细胞

B16BL6细胞类似产品：：HEI193细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞、MSF细胞

A-375SM细胞类似产品：：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞

S.B.细胞类似产品：：BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞

MDAMB134VI细胞类似产品：：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞

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Dakiki细胞类似产品：：LS411N细胞、DU 145细胞、U031细胞

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MDA436细胞类似产品：：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞

GM03573细胞类似产品：：L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞

C166细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞

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MESSA/Dx5细胞类似产品：：KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞

SU-DHL1细胞类似产品：：Hs695细胞、HEC1B细胞、Mono-Mac-6细胞

COR-L 105细胞类似产品：：CHP212细胞、MDCKII细胞、HCCLM3细胞

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H1836细胞类似产品：：H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞

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Daudi细胞类似产品：：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞

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149 PT细胞类似产品：：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞

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KYSE410细胞类似产品：：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞

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KY180细胞类似产品：：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞

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SUDHL-5细胞类似产品：：MX-1细胞、NCI-H929细胞、SKml2细胞

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UWB1-289细胞类似产品：：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞

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