Detroit 562 Cells(赠送Str鉴定报告)|人咽头癌胸水转移细胞

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细胞背景资料：器官：咽头 疾病：癌 取材转移灶：胸水

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

NCI N87细胞类似产品：：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞

BIC1细胞类似产品：：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞

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UPCI-SCC-154细胞类似产品：：C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞

H1522细胞类似产品：：Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：４传代，２-３天换液１次。

H2291细胞类似产品：：RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞类似产品：：HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞

EPC细胞类似产品：：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞

LICR-HN6细胞类似产品：：NK10a细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、T-ALL 1细胞

H-1770细胞类似产品：：RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

HEM-L细胞类似产品：：Z310细胞、SU.86.86细胞、ECC-12细胞

U343细胞类似产品：：HEK AD293细胞、FO [Mouse myeloma]细胞、SKNBE(2)细胞

TSU-Pr1细胞类似产品：：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞

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FL83B细胞类似产品：：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞

Hep II细胞类似产品：：NCIH1581细胞、Anglne细胞、MHCCLM3细胞

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

H-1048细胞类似产品：：3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞

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22Rv-1细胞类似产品：：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞

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H-1703细胞类似产品：：Porcine Kidney-13细胞、IOSE 80细胞、U343MG细胞

RCC-JF细胞类似产品：：HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞

TR146细胞类似产品：：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞

C8166细胞类似产品：：T 84细胞、Pa17C细胞、L-929细胞

JIII细胞类似产品：：MDA-MB-468细胞、LS1034细胞、3D4/21细胞

NE-4C细胞类似产品：：PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞

U-2932细胞类似产品：：Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞

G-292 clone A141B1细胞类似产品：：EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞

Rat Chondrosarcoma Swarm细胞类似产品：：HL1细胞、HEK-293A细胞、MES 23.5细胞

Hs 27细胞类似产品：：TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞

AE1201细胞类似产品：：COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞

NCI-H1417细胞类似产品：：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞

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