SK-MEL-3 Cells(赠送Str鉴定报告)|人恶性黑色素瘤细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

MPC-11细胞类似产品：：U2OS细胞、SJSA细胞、HIT.T15细胞

DHL4细胞类似产品：：IALM细胞、CALU 1细胞、GDM1细胞

CHP126细胞类似产品：：HC-11细胞、HCC2935细胞、LS174细胞

HSAS4细胞类似产品：：A 2058细胞、C8166细胞、MDA-MB-134VI细胞

D324细胞类似产品：：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：３-１：５传代，２-３天换液１次。

SNU182细胞类似产品：：U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞

NGP细胞类似产品：：CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞

OVCAR8细胞类似产品：：RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞

UPCI:SCC154细胞类似产品：：PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞

293E细胞类似产品：：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

HGSMC细胞类似产品：：TE12细胞、RC92A细胞、NCI H82细胞

H1373细胞类似产品：：Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞

624mel细胞类似产品：：COLO206细胞、K-562细胞、HUT-28细胞

HEL-1细胞类似产品：：SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞

LL2细胞类似产品：：UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞

C3H10T1-2细胞类似产品：：V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

PAN 02细胞类似产品：：MFM-223细胞、MTEC1细胞、RAW-264.7细胞

H-1930细胞类似产品：：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞

OP-9细胞类似产品：：MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞

MDA-MB453细胞类似产品：：CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞

OCI-Ly8细胞类似产品：：FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞

OCI Ly3细胞类似产品：：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞

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HuT 78细胞类似产品：：LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞

BV-2细胞类似产品：：SKG IIIa细胞、INS1-E细胞、Mo7e细胞

NCI-SNU-761细胞类似产品：：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞

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QBC(939)细胞类似产品：：HSC（Human Schwann）细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞

CCD966SK细胞类似产品：：KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞

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675T细胞类似产品：：L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞

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3T3-F442A细胞类似产品：：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞

S37细胞类似产品：：HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞

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U266-B1细胞类似产品：：PANC0403细胞、SK-MEL-5细胞、Super Tube细胞

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Calu-3细胞类似产品：：H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞

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Sp2/0细胞类似产品：：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞

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Panc 08.13细胞类似产品：：AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞

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U87 MG细胞类似产品：：F56 [Human neoplasm]细胞、Chinese Hamster Lung细胞、NCI-H929细胞

RCS细胞类似产品：：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞

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MDA-MB-435细胞类似产品：：NCI-H28细胞、3T3 L1细胞、HEK 293FT细胞

SU-86-86细胞类似产品：：HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞

HEY-A8细胞类似产品：：H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞

hTERT-RPE-1细胞类似产品：：SAS细胞、MASMC细胞、TE32细胞

HCE-T细胞类似产品：：Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞

LA-N-6细胞类似产品：：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞

R-1059-D细胞类似产品：：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞

NW-38细胞类似产品：：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞

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P30/OHK细胞类似产品：：WSU-HN13细胞、LCD细胞、PAEC细胞

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DU4475细胞类似产品：：LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞

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143B细胞类似产品：：JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞

HL 60细胞类似产品：：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞

U2932细胞类似产品：：RL95细胞、Rat-1细胞、HUT-226细胞

KATO III细胞类似产品：：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞

B-CPAP细胞类似产品：：MuM-2C细胞、SW 527细胞、KYSE 30细胞

2780细胞类似产品：：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞

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KBM-5细胞类似产品：：BPH-1细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、Oregon J-111细胞

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