A101D Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

"A101D Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。

细胞生长：贴壁

Mhh-Call 2细胞类似产品：：GP2-293细胞、RBVEC细胞、J 774A.1细胞

SUP-T1细胞类似产品：：N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞

MEG01细胞类似产品：：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞

P3X63 AG 8.653细胞类似产品：：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞

P3-NS1/1Ag 4.1细胞类似产品：：SIRC细胞、VERO C 1008细胞、H-2122细胞

A101D Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：４-１：６传代，２-３天换液１次。

2E8细胞类似产品：：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞

NCI-HUT-596细胞类似产品：：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞

C4-2 B细胞类似产品：：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞

H1672细胞类似产品：：MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞

DI TNC-1细胞类似产品：：MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

CAKI 1细胞类似产品：：OCI Ly10细胞、MILE SVEN1细胞、RC-4B/C细胞

Hi-5细胞类似产品：：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞

MONO-MAC 6细胞类似产品：：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞

Hs.27细胞类似产品：：H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞

QGY7703细胞类似产品：：Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞

IPLB-Sf21AE细胞类似产品：：NCI-H378细胞、NCI-SNU-520细胞、hFOB细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞类似产品：：FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞

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CALU 1细胞类似产品：：GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞

BSC-40细胞类似产品：：MC/9细胞、WiDrTC细胞、ANA1细胞

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H-1819细胞类似产品：：5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞

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OVCAR-433细胞类似产品：：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞

SK-N-BE2细胞类似产品：：SNT8细胞、NCI-H676B细胞、SUM159细胞

DITNC1细胞类似产品：：GES-1细胞、LU165细胞、HEK-AD293细胞

JG细胞类似产品：：SCC9细胞、High5细胞、MFE-296细胞

Fetal Bovine Heart Endothelial细胞类似产品：：HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞

MV-4:11细胞类似产品：：SUM-159-PT细胞、H-2171细胞、RL-95-2细胞

H-520细胞类似产品：：QGP-1细胞、HCC-1833细胞、LADMAC细胞

GM15452细胞类似产品：：Hs 343.T细胞、HEK-EBNA细胞、VP 267细胞

BEL7405细胞类似产品：：G422细胞、MB-49细胞、SW-948细胞

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