SCC-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鳞状细胞癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

C-8161细胞类似产品：：PLB-985细胞、BS-C-1细胞、SNU-423细胞

SK-N-BE(1)n细胞类似产品：：NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞

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CHO cell clone K1细胞类似产品：：HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞

C8D1A细胞类似产品：：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞

SCC-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鳞状细胞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。

细胞传代方法：１：４-１：８传代，２-３天换液１次。

Nittby-Salford 1细胞类似产品：：FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞

NCI-H1651细胞类似产品：：Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞

Mouse podocyte细胞类似产品：：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞

H-2141细胞类似产品：：67NR细胞、TK10细胞、bEND.3细胞

BAC1.2F5细胞类似产品：：LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

SCC-15 Cells(赠送Str鉴定报告)|人鳞状细胞癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞

COLO320-DM细胞类似产品：：HuO9细胞、RBMEC细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞

KP-N-RT细胞类似产品：：NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞

Los Angeles Prostate Cancer-4细胞类似产品：：SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞

SUNE1细胞类似产品：：GM06141B细胞、NCIH1930细胞、NCIH446细胞

MC 3T3-E1细胞类似产品：：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

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HRA-19细胞类似产品：：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞

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TE 32.T细胞类似产品：：SF 767细胞、WEHI-3B细胞、C1498细胞

Co-115细胞类似产品：：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞

UMUC14细胞类似产品：：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞

SUM-159-PT细胞类似产品：：Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞

FRTL5细胞类似产品：：HPASMC细胞、HARA-B细胞、FDCP-1细胞

HOSEpiC细胞类似产品：：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞

A1847细胞类似产品：：NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞

BJA-B-1细胞类似产品：：GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞

TK10细胞类似产品：：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞

PATU-S细胞类似产品：：SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞

H596细胞类似产品：：GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞

SW1271细胞类似产品：：BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞

SKG IIIa细胞类似产品：：HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞

293EBNA细胞类似产品：：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞

KYSE-510细胞类似产品：：OVCAR432细胞、KE37细胞、B78细胞

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