M14 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

H841细胞类似产品：：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞

HCC-70细胞类似产品：：Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞

149 PT细胞类似产品：：Hs 578T细胞、H-9细胞、SNU878细胞

ME-1 [Human leukemia]细胞类似产品：：Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞

HCC1954细胞类似产品：：MFE280细胞、A549-Taxol细胞、SKO3细胞

M14 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：３传代

MPVECs细胞类似产品：：WM 239A细胞、PL-9细胞、Hs819.T细胞

EFM-192A细胞类似产品：：H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞

MCA38细胞类似产品：：U-hth74细胞、DMS 273细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞

RPMI-8402细胞类似产品：：SuperTube细胞、ABE­8.1/2细胞、HDMEC细胞

KM12 SM细胞类似产品：：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：混合生长

WSU-DLCL(2)细胞类似产品：：MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞

RCC_7860细胞类似产品：：U-2 OS细胞、IOSE80UBC细胞、OLN93细胞

HEL-92-1-7细胞类似产品：：HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞

GM 2132细胞类似产品：：GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞

HNEpC细胞类似产品：：Jurkat-77细胞、M-NFS-60细胞、C4-I细胞

DLD-1细胞类似产品：：HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

L cells (TK-)细胞类似产品：：Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞

Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞类似产品：：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞

NALM6细胞类似产品：：Ramos (RA)细胞、IPEC-J2细胞、CTV1细胞

H-660细胞类似产品：：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞

GM2219C细胞类似产品：：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞

H2.35细胞类似产品：：LNT-229细胞、CCD1112Sk细胞、Karpas 299细胞

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PE/CA-PJ-34细胞类似产品：：SK-OV-433细胞、SUM52细胞、S-16细胞

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RPMI No. 1846细胞类似产品：：NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞

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A549/ATCC细胞类似产品：：DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞

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F36P细胞类似产品：：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞

HCPEpiC细胞类似产品：：PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞

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SW 579细胞类似产品：：ATN-1细胞、WM 115细胞、EPC细胞

PANC-10-05细胞类似产品：：SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞

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RAOEC细胞类似产品：：KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞

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3T6细胞类似产品：：L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞

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RT-4细胞类似产品：：CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞

LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞

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MCCAR细胞类似产品：：TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞

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CP-70细胞类似产品：：MHCC97-H细胞、SNU-5细胞、UMC-11细胞

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LIXC-002细胞类似产品：：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞

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AMC-HN-8细胞类似产品：：BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞

NCI-H3255细胞类似产品：：CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞

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H82sclc细胞类似产品：：Y 1细胞、SCC-4细胞、Pro-5WgaRI3C细胞

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LNCaP C4-2细胞类似产品：：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞

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H1876细胞类似产品：：22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞

Calu 6细胞类似产品：：LAN6细胞、H220细胞、K299细胞

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HEK293A细胞类似产品：：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞

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NCIH1755细胞类似产品：：FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞

SNU-620细胞类似产品：：DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞

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INS-1E细胞类似产品：：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞

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Uhth-74细胞类似产品：：HOS (TE85, Clone F5)细胞、P30-OHK细胞、OSKM-1细胞

A-9细胞类似产品：：LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞

NWA细胞类似产品：：NCI H2106细胞、OCI AML3细胞、Natural Killer-92细胞

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