SNU-368 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

BCP-1细胞类似产品：：P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞

KY70细胞类似产品：：MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞

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NCI-H508细胞类似产品：：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２传代

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WM451Lu细胞类似产品：：HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞

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MDA-kb2细胞类似产品：：COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

HRC-99细胞类似产品：：CW-2细胞、HA1800细胞、MO59J细胞

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BEAS-2B细胞类似产品：：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

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3T3-442A细胞类似产品：：SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞

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H2009细胞类似产品：：MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞

MDA134细胞类似产品：：RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞

NCIH2342细胞类似产品：：RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞

Hs742T细胞类似产品：：Colo741细胞、WERI-Rb 1细胞、Reuber H35细胞

CT26-clone 25细胞类似产品：：MRCV细胞、K299细胞、P31/Fujioka细胞

MES23.5细胞类似产品：：NCI-SNU-1040细胞、HEL-92-1-7细胞、ROS 17/2.8细胞

BSC-1细胞类似产品：：OCI-LY-19细胞、Pa14C细胞、SP2-0-Ag14细胞

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