DC2.4 Cells

"DC2.4 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠树突状细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

IM 9细胞类似产品：：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞

SKM-1细胞类似产品：：HGMC细胞、GM00637H细胞、L cells细胞

NCI-H1882细胞类似产品：：HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞

CWR22-R1细胞类似产品：：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞

ECC12细胞类似产品：：HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞

DC2.4 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠树突状细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：２传代

PaCa2细胞类似产品：：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞

BC3 H1细胞类似产品：：Hs-27细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、LAC细胞

COS1细胞类似产品：：Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞

Sol8细胞类似产品：：RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞

HIEC-6细胞类似产品：：GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

DC2.4 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠树突状细胞

细胞生长特性：贴壁生长　

SR-786细胞类似产品：：OCI/AML-4细胞、EFM-192B细胞、SK-RC-52细胞

OsA-CL细胞类似产品：：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞

COLO 829细胞类似产品：：F81细胞、Swiss3T3细胞、SK-UT-1细胞

ME1细胞类似产品：：TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞

T-84细胞类似产品：：SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞

RK 13细胞类似产品：：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

A375细胞类似产品：：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞

MFM-223细胞类似产品：：SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞

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C33细胞类似产品：：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞

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TE-11细胞类似产品：：HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞

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Granta-519细胞类似产品：：RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞

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Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞类似产品：：T-84细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、PA I细胞

CAL33细胞类似产品：：RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞

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SPC-A-1细胞类似产品：：CEM.C1细胞、BC-024细胞、751细胞

SF126细胞类似产品：：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞

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BE(2)-C细胞类似产品：：NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞

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L-132细胞类似产品：：CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞

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HEC251细胞类似产品：：CL1-0细胞、IHH4细胞、MDA453细胞

HCC70细胞类似产品：：NCIH1819细胞、KHYG-1细胞、MCF-10 Attached细胞

Ca-Ski细胞类似产品：：LIM1215细胞、KPNRTBM1细胞、L-1210细胞

SK-MEL-1细胞类似产品：：BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞

A20细胞类似产品：：HNE2细胞、HME1细胞、95C细胞

H4-IIE-C3细胞类似产品：：CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞

BRL-3A细胞类似产品：：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞

DC 2.4细胞类似产品：：526细胞、HFLS-OA细胞、NBL-S细胞

H69细胞类似产品：：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞

A549 ATCC细胞类似产品：：ECC1细胞、L23/P细胞、Wien-133细胞

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