UWB1.289+BRCA1 Cells

"UWB1.289+BRCA1 Cells(赠送Str鉴定报告)|细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

B16 BL6细胞类似产品：：KOSC2细胞、HeLa/S3细胞、Jurkat-77细胞

HCT116/L细胞类似产品：：PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞

Buffalo Rat Liver-3A细胞类似产品：：VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞

JVM-3细胞类似产品：：KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞

SVEC4-10细胞类似产品：：Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２传代

MV4:11细胞类似产品：：P30OHK细胞、K1细胞、BXPC3细胞

SU86_86细胞类似产品：：HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞

NK-92细胞类似产品：：WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞

GC-2spd(ts)细胞类似产品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞

CHAGOK1细胞类似产品：：Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长　

HuH7细胞类似产品：：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞

ACC-2细胞类似产品：：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞

SP2-0-Ag14细胞类似产品：：KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞

MM.1S细胞类似产品：：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞

GM05372E细胞类似产品：：SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞

RCS细胞类似产品：：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

L615细胞类似产品：：GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞

C33细胞类似产品：：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞

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Med 283细胞类似产品：：MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞

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U251细胞类似产品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞

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NCI-H929细胞类似产品：：S3-HeLa细胞、KYSE-140细胞、MDAMB415细胞

BI-Mel细胞类似产品：：KHYG-1细胞、Human Liver-7702细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞

H2052_MM细胞类似产品：：SNU-368细胞、YES2细胞、COLO-320DM细胞

C3H/10T1/2 clone 8细胞类似产品：：JEG3细胞、MFE280细胞、J774A.1细胞

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