Eca-109 Cells(赠送Str鉴定报告)|人食管癌细胞

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细胞背景资料：１９７３年建系，来自人食管中段鳞癌组织，小块法原代培养建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

JM-1细胞类似产品：：RPMI No. 1846细胞、Clone Y-1细胞、H7721细胞

SNU-C2B细胞类似产品：：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞

YD-38细胞类似产品：：H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞

SUP T1细胞类似产品：：BT-325细胞、MT-2细胞、SKNF1细胞

Hs 934.T细胞类似产品：：MV4-11细胞、NCIH2030细胞、G 401细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

J82细胞类似产品：：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞

NCIH2107细胞类似产品：：H295R细胞、CD-18细胞、Hs 822.T细胞

CG-4细胞类似产品：：Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞

PZ-HPV-7细胞类似产品：：NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞

SUPT-1细胞类似产品：：RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

Chang Cells细胞类似产品：：Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞

HCA-7细胞类似产品：：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞

H-748细胞类似产品：：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞

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TR 146细胞类似产品：：SW1222细胞、SNB19细胞、KM H-2细胞

MDAMB436细胞类似产品：：SW-1990细胞、UMR-106细胞、SJRH-30细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

SKOV3细胞类似产品：：MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞

Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞类似产品：：HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞

RPE1-hTERT细胞类似产品：：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞

OsA-CL细胞类似产品：：TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞

Lu-99A细胞类似产品：：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞

CT26.CL25细胞类似产品：：MDA-435细胞、H-64细胞、H2122细胞

HCE-2 [50.B1]细胞类似产品：：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞

SNU-216细胞类似产品：：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞

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GM346细胞类似产品：：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞

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PJ34细胞类似产品：：P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞

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H520细胞类似产品：：EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞

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JEKO细胞类似产品：：H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞

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CHP-212细胞类似产品：：RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞

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ZR75-30细胞类似产品：：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞

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RS4:11细胞类似产品：：PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞

RA.1细胞类似产品：：TT细胞、H-1092细胞、COLO 680N细胞

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I90细胞类似产品：：MES 13细胞、SW1463细胞、INS-1细胞

RAW 264.7细胞类似产品：：NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞

Fetal Bovine Heart Endothelial细胞类似产品：：HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞

HM1900细胞类似产品：：Hs 636.T细胞、RFL6细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞

SK-RC-20细胞类似产品：：CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞

OCI-Ly 19细胞类似产品：：SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞

SK.OV.3细胞类似产品：：HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞

BALL-1细胞类似产品：：HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞

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