COLO 320 Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

MKN-74细胞类似产品：：RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞

Panc8.13细胞类似产品：：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞

OCI-AML3细胞类似产品：：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞

HCC-94细胞类似产品：：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞

H1184细胞类似产品：：OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞

COLO 320 Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

CNE-2Z细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞

UMUC-14细胞类似产品：：HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞

MC3T3-L1细胞类似产品：：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞

OPM-2细胞类似产品：：NK-92MI细胞、OVCAR-420细胞、MSC细胞

Panc05.04细胞类似产品：：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

COLO 320 Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

细胞生长特性：贴壁

T2细胞类似产品：：HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞

SNB-19细胞类似产品：：LP1细胞、CCD18细胞、SKOV3细胞

Centre Antoine Lacassagne-78细胞类似产品：：H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞

CAL-33细胞类似产品：：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞

H-810细胞类似产品：：SKRC-42细胞、COLO-320DM细胞、H 9细胞

TCMK1细胞类似产品：：CMT.64细胞、OCI Ly1细胞、H-23细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

KBM7细胞类似产品：：C3A细胞、MDA-MB-231-luc细胞、HS-766-T细胞

G-402细胞类似产品：：FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞

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MDA1386细胞类似产品：：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞

174xCEM.T2细胞类似产品：：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞

P388-D1细胞类似产品：：SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞

Mia PACA 2细胞类似产品：：U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞

NCCIT细胞类似产品：：L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞

BC-021细胞类似产品：：Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞

BrCL12细胞类似产品：：LM2-4175细胞、HM06.A1细胞、EOL1细胞

ARPE-19细胞类似产品：：CoCL3细胞、SU8686细胞、H1944细胞

KU-812细胞类似产品：：PC14细胞、hCMEC/D3细胞、Human Embryo Kidney-2细胞

L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：ECC-12细胞、SU.86.86细胞、GM00637H细胞

C4-2 B细胞类似产品：：MonoMac6细胞、GM05384细胞、SUPB15细胞

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