BEL-7405 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

PFSK-1细胞类似产品：：GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞

MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞类似产品：：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞

PK 15细胞类似产品：：MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞

NS20Y细胞类似产品：：MA-782细胞、bEnd.3[BEND3]细胞、Mc Coy细胞

RCM1细胞类似产品：：J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

收到常温复苏细胞后，具体操作步骤1)首先，观察细胞培养瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。2)用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。3)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。4)静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。5)贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。6)悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。温馨提醒：1)可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。2)确认细胞状态良HAO后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NCIH929细胞类似产品：：U-251MG细胞、HuCCT-1细胞、MARC145细胞

IPLB-Sf21细胞类似产品：：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品：：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞

Ly19细胞类似产品：：CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞

SKNBE2细胞类似产品：：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

ECC-12细胞类似产品：：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞

GC9811-P细胞类似产品：：Anip973细胞、HNE-3细胞、BE2_C细胞

H446细胞类似产品：：SUIT 2细胞、OV-CA 432细胞、SF 767细胞

SK 1细胞类似产品：：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞

HCC-1500细胞类似产品：：SKMES1细胞、Nb-2细胞、SW-1783细胞

RPMI7951细胞类似产品：：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

PT-K75细胞类似产品：：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞

hADSCs细胞类似产品：：CLONE M3细胞、MESSA Dx5细胞、J82COT细胞

SN12C-PM6细胞类似产品：：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞

P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞

Jurkat E6-1细胞类似产品：：CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞

P3 88 D1细胞类似产品：：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞

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C-28/I2细胞类似产品：：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞

STTG1细胞类似产品：：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞

T-T细胞类似产品：：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞

NCTC 929细胞类似产品：：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞

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MM-1S细胞类似产品：：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞

H2196细胞类似产品：：LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞

EoL-1细胞类似产品：：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞

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BEL-7405 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

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PK-15细胞类似产品：：PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞

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M07e细胞类似产品：：BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞

OV 2008细胞类似产品：：FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞

4T1.2细胞类似产品：：SHG-44细胞、143 B细胞、Colon26细胞

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B16-F0细胞类似产品：：Hs737T细胞、AK细胞、HOEC细胞

DAN-G细胞类似产品：：aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞

VMRCRCZ细胞类似产品：：BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞

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MES-SA/Dx-5细胞类似产品：：RS1细胞、HEK 293T/17细胞、HSCT6细胞

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Swiss/3T3细胞类似产品：：Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞

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GM03320D细胞类似产品：：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞

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