RLE-6TN Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肺泡Ⅱ型细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

PC615.3细胞类似产品：：HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞

SK-LU-1细胞类似产品：：OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞

SK RC 52细胞类似产品：：RCC-10细胞、NCI-BL2141细胞、H-322细胞

Hmy.2 CIR细胞类似产品：：Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞

SNU-407细胞类似产品：：HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

RIN-14B细胞类似产品：：Uhth-74细胞、TE11细胞、TE10细胞

TF-1a细胞类似产品：：Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞

SW1463细胞类似产品：：H69细胞、SF539细胞、TE1细胞

CORL51细胞类似产品：：H1299细胞、CF Pac1细胞、Hs746-T细胞

MIMVEC细胞类似产品：：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

SKNO1细胞类似产品：：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞

NCI-H1836细胞类似产品：：GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞

Mouse podocyte细胞类似产品：：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞

CEM-CCRF细胞类似产品：：PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞

NCI.H23细胞类似产品：：KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞

SNU251细胞类似产品：：LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

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GCT细胞类似产品：：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞

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C4-2细胞类似产品：：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞

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Ca9-22细胞类似产品：：C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞

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159PT细胞类似产品：：NCI-H2122细胞、SuDHL 8细胞、CCD-1112sk细胞

ECC-1细胞类似产品：：3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞

BI-Mel细胞类似产品：：KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞

Hs 683细胞类似产品：：RDES细胞、Hs606细胞、HuH-6细胞

U138细胞类似产品：：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞

HCC 38细胞类似产品：：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞

EL 4细胞类似产品：：L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞

LYR细胞类似产品：：SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞

L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞

HUT 226细胞类似产品：：HCC-2185细胞、HCoEpiC细胞、CMT 167细胞

MB157细胞类似产品：：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞

LC-1细胞类似产品：：NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞

beta TC6细胞类似产品：：RPMI1788细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞、STTG1细胞

N-2a细胞类似产品：：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞

TE-9细胞类似产品：：DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞

HCASMC细胞类似产品：：NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞

COLO-1细胞类似产品：：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞

CHP 126细胞类似产品：：H-23细胞、OVCAR.3细胞、Cates-1B细胞

COLO-205细胞类似产品：：NCI-H1105细胞、Huh7.5细胞、NeHepLxHT细胞

MNNG/HOS细胞类似产品：：H2195细胞、MGH-U3细胞、RCC_7860细胞

EBC-1/original细胞类似产品：：Caki-2细胞、FRTL5细胞、HO8910/PM细胞

C8166细胞类似产品：：IEC 6细胞、H1694细胞、SVHUC细胞

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