Y1 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肾上腺皮质瘤细胞

"Y1 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肾上腺皮质瘤细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

DI TNC-1细胞类似产品：：MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞

CV-1 in Origin Simian-1细胞类似产品：：H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞

H-1568细胞类似产品：：HKC细胞、Me Wo细胞、NP69SV40T细胞

OVCAR-3细胞类似产品：：TE10细胞、SW1417细胞、LN-382细胞

MDA MB 231细胞类似产品：：L5178Y-R细胞、MX1细胞、E.G7-OVA细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HCC-1599细胞类似产品：：B/C3T3细胞、HBEpiC细胞、Human ErythroLeukemia细胞

HT55细胞类似产品：：SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞

SKO3细胞类似产品：：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞

KYSE270细胞类似产品：：2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞

OV-CA 432细胞类似产品：：KLM-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞、OP-9细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

TE-32细胞类似产品：：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞

CHL-CL-11细胞类似产品：：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞

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Mino细胞类似产品：：EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞

HuH6细胞类似产品：：Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞

HOS TE85细胞类似产品：：Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

C33细胞类似产品：：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞

H-1869细胞类似产品：：Tb 1-Lu细胞、ES2细胞、EoL-1细胞

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COLO-320细胞类似产品：：AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞

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JKT1细胞类似产品：：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞

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Panc 05.04细胞类似产品：：KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞

Y1 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肾上腺皮质瘤细胞

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MB49细胞类似产品：：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞

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Y1 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠肾上腺皮质瘤细胞

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MuM-2B细胞类似产品：：MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞

Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞

SUM 52细胞类似产品：：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞

BrCL15细胞类似产品：：Hep II细胞、Cates 1B细胞、P388-D1细胞

B16-F10细胞类似产品：：Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞

alpha TC1.6细胞类似产品：：HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞

3T3 Swiss Albino细胞类似产品：：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞

MDA-MB-231 #4175细胞类似产品：：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞

MNNGHOS细胞类似产品：：BIC1细胞、V 79细胞、H28细胞

Hs852T细胞类似产品：：UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞

BV-173细胞类似产品：：Hs 940.T细胞、Mv1.Lu细胞、H676细胞

LTEP-sm细胞类似产品：：NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞

MDA-MB-134 VI细胞类似产品：：G292细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞、Plaepi 34细胞

H522细胞类似产品：：HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞

A-10细胞类似产品：：Co-115细胞、CF-PAC1细胞、SJ-RH30细胞

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