FRTL-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠甲状腺细胞

"FRTL-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠甲状腺细胞

细胞背景资料：甲状腺；自发永生；Fischer

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

SUM-159-PT细胞类似产品：：Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞

AN3-CA细胞类似产品：：UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞

LTEP a2细胞类似产品：：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞

Clone Y-1细胞类似产品：：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞

RPMI8402细胞类似产品：：C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞

FRTL-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠甲状腺细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

IMR32细胞类似产品：：Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞

ZYM-SVEC01细胞类似产品：：EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞

SK-N-AS细胞类似产品：：FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞

NCI-H64细胞类似产品：：HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞

HBL-100细胞类似产品：：NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

FRTL-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠甲状腺细胞

细胞生长特性：贴壁

NCI-BL6细胞类似产品：：HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞

Kit-225-K6细胞类似产品：：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE­8.1/2细胞

H-1694细胞类似产品：：HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞

TE-14细胞类似产品：：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞

Tissue Culture-1细胞类似产品：：CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞

L-540细胞类似产品：：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。

OC-3-VGH细胞类似产品：：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞

Plaepi 34细胞类似产品：：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞

RMC-1细胞类似产品：：VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞

MDA MB 361细胞类似产品：：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞

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X63Ag8-653细胞类似产品：：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞

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CA-46细胞类似产品：：B-95-8细胞、Daoy细胞、9L细胞

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MB468细胞类似产品：：Pt-K2细胞、BT325细胞、HEK-293A细胞

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8305-C细胞类似产品：：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞

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MIHA细胞类似产品：：HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞

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SUDHL-6细胞类似产品：：MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞

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JJN-3细胞类似产品：：HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞

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HT144-mel细胞类似产品：：MDA MB 436细胞、C6细胞、IHH细胞

DMS 53细胞类似产品：：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞

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H2081细胞类似产品：：hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞

SMA560细胞类似产品：：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞

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G401细胞类似产品：：PaTu-8988s细胞、GM03571细胞、H322细胞

CT26.WT细胞类似产品：：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞

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Panc-03.27细胞类似产品：：COLO 320F细胞、NKT细胞、B16-BL6细胞

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MM-1S细胞类似产品：：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞

MHCC-LM3细胞类似产品：：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞

SNUC2B细胞类似产品：：PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞

NCIH2110细胞类似产品：：CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞

NCI-H2452细胞类似产品：：SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞

TOV21细胞类似产品：：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞

AKR细胞类似产品：：PA-TU S细胞、RS 4;11细胞、184A1细胞

VMCUB-1细胞类似产品：：Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞

MDA-MB-468-RED细胞类似产品：：GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞

RMC细胞类似产品：：NBL-2细胞、NCI-H1355细胞、Hs343T细胞

Hs 604.T细胞类似产品：：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞

MHCC-LM3细胞类似产品：：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞

H-1915细胞类似产品：：S180细胞、SUM52细胞、NCI-H508细胞

HFTF细胞类似产品：：HeLa细胞、DI-TNC1细胞、8226/S细胞

RMC-1细胞类似产品：：VM-CUB-I细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、BEAS-2B细胞

CAL51细胞类似产品：：TF-1细胞、MDA231-LM2-4175细胞、HTR-8/SV neo细胞

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