FHC Cells(赠送Str鉴定报告)|人正常结直肠粘膜细胞

"FHC Cells(赠送Str鉴定报告)|人正常结直肠粘膜细胞

细胞背景资料：胎儿；结肠；自发永生；男性

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

H283细胞类似产品：：U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞

Pt K1 (NBL-3)细胞类似产品：：Jurkat 77细胞、Hs-281-T细胞、Huh-7.5.1细胞

RH-30细胞类似产品：：IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞

PL45细胞类似产品：：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞

CMT-64细胞类似产品：：GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞

FHC Cells(赠送Str鉴定报告)|人正常结直肠粘膜细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

COLO 824细胞类似产品：：KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞

801-D细胞类似产品：：IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞

NCIH1792细胞类似产品：：HOS TE85细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞、HCC1833细胞

YH-13细胞类似产品：：HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞

MC-CAR细胞类似产品：：NSH细胞、SKLU1细胞、BE2M17细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

HCC-9204细胞类似产品：：MNNGHOS细胞、Sp2/0-Ag-14细胞、FTC-133细胞

Duck embryo细胞类似产品：：ECC12细胞、SCLC21H细胞、Sp 2817细胞

OCI-AML4细胞类似产品：：HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞

PVEC细胞类似产品：：L-5178-Y细胞、MDAMB453细胞、HeLaS3细胞

MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞类似产品：：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞

SK-N-BE(2)细胞类似产品：：H2023细胞、NEC8细胞、CALU 1细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

Rat-2细胞类似产品：：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞

U-87MG ATCC细胞类似产品：：BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞

NCIH647细胞类似产品：：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞

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OV433细胞类似产品：：HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞

G-361细胞类似产品：：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞

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HuTu-80细胞类似产品：：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞

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MUS-M1细胞类似产品：：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞

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JB-6 Cl 30细胞类似产品：：U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞

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ANA1细胞类似产品：：C-127细胞、KBM7细胞、H-2081细胞

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KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

细胞类似产品：：NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞

FD-LSC-1细胞类似产品：：DI-TNC1细胞、DK-MG细胞、C127细胞

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U-hth74细胞类似产品：：MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞

UCLA SO M14细胞类似产品：：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞

GC1-SPG细胞类似产品：：SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞

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Hs675T细胞类似产品：：A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞

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H-1781细胞类似产品：：RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞

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TE354.T细胞类似产品：：S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞

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NCIH841细胞类似产品：：C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞

SEG-1细胞类似产品：：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞

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UCLA-SO-14细胞类似产品：：NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞

HEp-2细胞类似产品：：Jurkat-E6细胞、HCC38细胞、beta TC6细胞

Clone 15 HL-60细胞类似产品：：Hs-578Bst细胞、CW-2细胞、KU-19-19细胞

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