GEO Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

"GEO Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

细胞背景资料：结肠癌

细胞形态：上皮细胞样

细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用，如细胞密度GAO于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。

细胞生长：贴壁

Meat Animal Research Center-145细胞类似产品：：Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞

SKLU01细胞类似产品：：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞

MKN-28细胞类似产品：：H820细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞、HTh 74细胞

GM04678细胞类似产品：：P388细胞、L cells (TK-)细胞、GCT细胞

LTEP-sm 1细胞类似产品：：Mono-Mac-6细胞、UPCI-SCC-090细胞、SNU-475细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

ME16C细胞类似产品：：NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞

KM12-SM细胞类似产品：：143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞

CHG5细胞类似产品：：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞

MDAMB415细胞类似产品：：293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞

Potorous tridactylus Kidney 1细胞类似产品：：Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

U266细胞类似产品：：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞

CMECs细胞类似产品：：H-1573细胞、JHH2细胞、mREC细胞

HC11 Mammary Epithelium细胞类似产品：：F98细胞、H-1734细胞、4T1.2细胞

3D4/21细胞类似产品：：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞

HPaSteC(HPSC)细胞类似产品：：C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞

JB6 Cl 30-7b细胞类似产品：：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞

培养细胞真的不难，Zui关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越HAO。另外，要掌握HAO胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Zui近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做HAO支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候ZuiHAO给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

JOSK-M细胞类似产品：：SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞

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Calu6细胞类似产品：：Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞

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Hs-729-T细胞类似产品：：RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞

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HCC-202细胞类似产品：：RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞

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Hs606细胞类似产品：：JHH7细胞、HDMEC细胞、Panc 8.13细胞

TE-14细胞类似产品：：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞

NTERA2细胞类似产品：：NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞

NCI-H2591细胞类似产品：：AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞

MDBK (NBL-1)细胞类似产品：：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞类似产品：：SNU-869细胞、SK-Col-1细胞、D341细胞

ARO细胞类似产品：：2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞

HS940细胞类似产品：：Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞

CCD-841CoN细胞类似产品：：HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞

HCT-116细胞类似产品：：TGW-I-nu细胞、HS 1.Tes细胞、HCET细胞

KLN 205细胞类似产品：：MDA-MB-175细胞、NCIH661细胞、HCC-38细胞

S16细胞类似产品：：MS751细胞、HOPC细胞、NCI-H322T细胞

MDA MB 361细胞类似产品：：H3255_DA细胞、LS411N细胞、WIL2S细胞

CCC-HEH-2细胞类似产品：：SNU-182细胞、Kit 225 K6细胞、95C细胞

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