LA-N-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞

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细胞背景资料：神经母细胞瘤；骨髓转移；男性

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

COLO357细胞类似产品：：NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞

OK细胞类似产品：：Y3-Ag123细胞、C-8161细胞、KU 812细胞

Panc 02细胞类似产品：：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞

MLE-12细胞类似产品：：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞

L-cell细胞类似产品：：MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

Pt K2细胞类似产品：：Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞

NCI-H1437细胞类似产品：：H2141细胞、MV 3细胞、KBM-7/Hap8细胞

MHCC97H细胞类似产品：：Melanoma 14细胞、M-O7e细胞、H2030细胞

PAN 02细胞类似产品：：MFM-223细胞、MTEC1细胞、RAW-264.7细胞

E.L.4细胞类似产品：：HEL9217细胞、HEL299细胞、SVHUC细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

MES-SA Dx5细胞类似产品：：Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞

HeLa细胞类似产品：：Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞

CHP 100细胞类似产品：：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞

MDCK-2细胞类似产品：：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞

HMEL细胞类似产品：：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞

RBMEC细胞类似产品：：mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

Hs852细胞类似产品：：FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞

MCF 7细胞类似产品：：293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞

RPMI 8226细胞类似产品：：LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞

Centre Antoine Lacassagne-33细胞类似产品：：Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞

HGF-1细胞类似产品：：PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞

HCC-78细胞类似产品：：H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞

IMR 90细胞类似产品：：SNU-398细胞、SCLC-21H细胞、Sp2/mIL-6细胞

TCC Sup细胞类似产品：：Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞

MGC-803细胞类似产品：：NMC-G1细胞、Leukemic 1210细胞、SKMEL-24细胞

Hs940T细胞类似产品：：A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞

HCC-2218细胞类似产品：：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞

HS578T细胞类似产品：：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞

Tca-8113细胞类似产品：：KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞

HCC1954 BL细胞类似产品：：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞

MC57细胞类似产品：：NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞

JVM-3细胞类似产品：：KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞

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NKM-1细胞类似产品：：ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞

H1770细胞类似产品：：H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞类似产品：：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞

H1755细胞类似产品：：Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞

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BJ1细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞

BPH1细胞类似产品：：U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞

ISHI细胞类似产品：：SF17细胞、MC-26细胞、NCI-SNU-387细胞

RPTEC/TERT 1细胞类似产品：：RFL6细胞、NCIH1568细胞、Psi2 DAP细胞

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143TK-细胞类似产品：：BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞

Hs819T细胞类似产品：：HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞

H2030细胞类似产品：：Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞

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NCIH146细胞类似产品：：NCI-H64细胞、A375SM细胞、293-F细胞

MHCC97-H细胞类似产品：：Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、RIN m5F细胞、MC3T3-E1(C4)细胞

HL 60细胞类似产品：：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞

SW-1222细胞类似产品：：SEG1细胞、GTL 16细胞、RCK-8细胞

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COV362细胞类似产品：：SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞

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H508细胞类似产品：：ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞

EL-4细胞类似产品：：NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞

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DU 4475细胞类似产品：：WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞

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WEHI 231细胞类似产品：：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞

KM12SM细胞类似产品：：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞

OACP4 C细胞类似产品：：H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞

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MFHL-2细胞类似产品：：Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞

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PIG1细胞类似产品：：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞

H295细胞类似产品：：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞

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Vero-E6细胞类似产品：：LS-513细胞、KMH-2细胞、PSN1细胞

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SO-Rb 50细胞类似产品：：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞

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SW-982细胞类似产品：：LADMAC细胞、C4I细胞、YD-38细胞

Z310细胞类似产品：：NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞

MHCC 97-L细胞类似产品：：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞

MCF12A细胞类似产品：：EST50细胞、NCI-SNU-C2B细胞、GC-2细胞

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UMRC-2细胞类似产品：：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞

HAEC细胞类似产品：：Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞

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NIH:OVCAR-5细胞类似产品：：Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞

GM02131细胞类似产品：：NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞

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SW1417细胞类似产品：：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞

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MB231细胞类似产品：：MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞

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Panc 5.04细胞类似产品：：WBF344细胞、CA-OV-3细胞、MESSA Dx5细胞

RT112细胞类似产品：：RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞

MDCK细胞类似产品：：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞

GM-346细胞类似产品：：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞

Roswell Park Memorial Institute 2650细胞类似产品：：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞

K422细胞类似产品：：N2a细胞、DHL-8细胞、Chang Cells细胞

HuH6细胞类似产品：：Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞

Kelly细胞类似产品：：OSC19细胞、CHL-IU细胞、CCD-1095Sk细胞

ARIP细胞类似产品：：AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞

CCD 966 SK细胞类似产品：：A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞

Tb 1-Lu细胞类似产品：：BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞

HuT-78细胞类似产品：：LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞

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HSC-6细胞类似产品：：PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞

Panc10.05细胞类似产品：：MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞

WiDr-TC细胞类似产品：：Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、SUM-190PT细胞、WIL2 Secreting细胞

MDA-MB 361细胞类似产品：：Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞

Mouse Bladder Tumor line-2细胞类似产品：：NPA87-1细胞、Porcine Kidney-15细胞、IPLB-SF-21细胞

T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞类似产品：：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞

HT 1080.T细胞类似产品：：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞

SUM-190PT细胞类似产品：：SK-N-F1细胞、Calu-1细胞、CWR22-R1细胞

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LK 2细胞类似产品：：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞

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TE 671细胞类似产品：：SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞

Jiyoye(P-2003)细胞类似产品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞

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P3/X63/Ag8细胞类似产品：：NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞

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HCC2157细胞类似产品：：IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞

U373 MG细胞类似产品：：D-341细胞、NUGC-4细胞、H-1395细胞

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Kit-225-K6细胞类似产品：：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE­8.1/2细胞

CCRF.CEM细胞类似产品：：OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞

WB F344细胞类似产品：：T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞

COS-1细胞类似产品：：OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞

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SRA01/04细胞类似产品：：SUM-149PT细胞、MAEC细胞、Colo-201细胞

UC-3细胞类似产品：：HCFB（HCF）细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞

U251n细胞类似产品：：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞

CNE1-LUC细胞类似产品：：TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞

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CACO2细胞类似产品：：PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞

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SAOS 2细胞类似产品：：EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞

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MGH-U3 (RN)细胞类似产品：：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞

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3T3-F442A细胞类似产品：：LTPA细胞、786-0WT细胞、CFPAC-1细胞

NCI-H87细胞类似产品：：7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞

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H9细胞类似产品：：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞

A-253细胞类似产品：：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞

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PAI细胞类似产品：：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞

NCI-SNU-449细胞类似产品：：MDA-MB-330细胞、D-341Med细胞、EOC20细胞

CaEs17细胞类似产品：：X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞

RPVSMC细胞类似产品：：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞

C22 (Clara)细胞类似产品：：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞

4T1-A细胞类似产品：：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞

LA-N-5 Cells(赠送Str鉴定报告)|人神经母细胞瘤细胞

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