喜树碱，是1966年由美国学者从我国特有树种喜树(Camptothecaacuminata)中提取得到的具有广谱抗肿瘤活性的生物碱，并由此而命名。10-羟基喜树碱是喜树碱的天然衍生物，是我国广泛临床用的抗肿瘤药物。此外，喜树碱和10-羟基喜树碱是目前已获美国食品及药品管理局(FDA)批准临床应用的喜树碱类抗肿瘤药物CPT-11(Irinotecan，用于治疗直肠/结肠癌)、TPT(Topotecan，用于治疗卵巢癌)的半合成前体化合物。
传统生产方法
目前，喜树碱一般从喜树中提取得到，10-羟基喜树碱主要经由喜树碱生物合成制备。
国家知识产权局专利局于1996年5月8日公开了一种喜树碱的提取方法，该发明专利是以喜树的果实或根皮为原料提取喜树碱。它采用磨粉→水煮→煮液浓缩→膏状物→乙醇分离树胶杂质→析出粗品→氯仿混合液多次重结晶得到产品的工艺路线。
1999年12月22日，国家知识产权局专利局公开了一种喜树碱的生产方法，该发明专利以喜树叶为主要原料，果实为辅助原料生产喜树碱。它采用原料粉碎→乙醇渗漉→超临界二氧化碳萃取剩余物质→浓缩渗漉液和萃取液→大孔吸附树脂柱层析→重结晶后得到产品的工艺路线。
2000年4月26日又公开了另外一种喜树碱的生产方法，该发明专利涉及一种以喜树叶及果实为原料，生产喜树碱的工艺方法。它采用原料粉碎→乙醇及水渗漉→浓缩渗漉液→大孔吸附树脂柱层析→重结晶后得到产品的工艺路线。
上述三种方法在以喜树果实为原料生产喜树碱时，均未考虑到原料中尚含有10-羟基喜树碱(含量约为喜树碱的10％)，提取纯化后所得产品可创造相当于喜树碱产品的产值(10-羟基喜树碱价格为喜树碱的10倍以上)，因而造成了10-羟基喜树碱资源的浪费。
技术内容
本发明的目的在于提供一种以2～40天的喜树幼苗或喜树果实为原料，产品得率高、生产成本低的喜树碱、10-羟基喜树碱的生产工艺方法。
为了达到上述目的，本发明以2～40天的喜树幼苗或喜树果实为原料经粉碎→乙醇渗漉萃取→萃取液浓缩至浓水溶液→大孔吸附树脂柱层析→不同溶剂解吸液浓缩分别得喜树碱、10-羟基喜树碱粗品→分别重结晶后得喜树碱、10-羟基喜树碱的工艺路线。
本发明的优点是
1、2～40天的喜树幼苗中10-羟基喜树碱含量可与喜树碱含量相当。以2～40天的喜树幼苗为原料生产喜树碱、10-羟基喜树碱，产品得率高，生产成本低，经济效益十分可观。
2、以喜树果实为原料生产喜树碱、10-羟基喜树碱，可避免资源浪费。
3、本发明以2～40天喜树幼苗为原料，喜树碱产品收率为0.4‰，10-羟基喜树碱产品收率为0.2‰；以喜树果实为原料，喜树碱产品收率为0.3‰，10-羟基喜树碱产品收率为0.02‰。
4、本发明的喜树碱产品纯度可超过97.5％，10-羟基喜树碱产品纯度可达90％。
5、本发明在生产过程中不使用毒性高的氯仿和甲醇，环境污染小，对生产人员的毒害小。
具体实施
将发芽2～40天的喜树幼苗去除果皮后60～80℃烘干24小时，粉碎至20目。取10千克喜树幼苗粉经7倍体积60％乙醇渗漉萃取后，将所得萃取液浓缩至原体积的1/4。浓缩液直接通过惰性大孔吸附树脂柱进行吸附，吸附后用蒸馏水洗涤至基本无色，以20倍柱体积乙酸乙酯解吸后，再以20倍柱体积乙酸乙酯/乙醇(体积比1∶1)。分别收集合并乙酸乙酯解吸液及乙酸乙酯/乙醇解吸液，浓缩后分别析出喜树碱、10-羟基喜树碱粗品，最后分别经乙酸乙酯/乙醇(体积比1∶1)重结晶得到喜树碱产品4克(得率为0.4‰)、10-羟基喜树碱产品2克(得率为0.2‰)。