不使用有机溶剂制备α-熊果苷的方法

2024/6/26 13:57:39 作者:云霄

α-熊果苷是β-熊果苷的差向异构体,其氧苷键在空间的方向与β-熊果苷的方向相比正好相反。α-熊果苷对黑色素合成酶——酪氨酸酶具有很好的抑制作用,对人体肌肤的美白作用是β-熊果苷的10倍以上,并且不会抑制人体细胞的生长,无毒副作用。经研究发现α-熊果苷对紫外线灼伤导致的瘢痕有较好的治疗功效,有较好的抗炎、修复和美白的作用。

α-熊果苷

国内外现有方法

目前,国际上主要采用酶法转化生产α-熊果苷,后提取工艺主要采用有机溶剂萃取分离未反应的对苯二酚,层析柱吸附α-熊果苷及糖,采用不同浓度甲醇洗脱分离糖及糖苷,由于后提取工艺过程复杂,成本较高,α-熊果苷的国际售价一直居高不下。国内也有一些公司生产α-熊果苷,主要采用黄单胞菌细胞催化法,后提取采用大孔吸附树脂分离提纯,亦使用有机溶剂洗脱,以及大量酸碱再生树脂,生产成本较高,产品质量不稳定,难以实现大规模生产。

制备步骤

步骤1,将淀粉类物质作为糖基供体分散在蒸馏水中,加入对苯二酚作为糖基受体进行均匀混合,并调节反应溶液的pH为5—6,加入淀粉类物质的生物酶进行反应;在步骤1中,淀粉类物质为蔗糖、支链或者直链淀粉、环糊精、麦芽糊精或者麦芽低聚糖;淀粉类物质的生物酶为蔗糖磷酸化酶、淀粉酶、环糊精葡萄糖基转移酶或者糖基转移酶;淀粉类物质与对苯二酚的质量比例为(20:1)~(1:10),选择在40—60℃下反应24—48h;淀粉类物质的生物酶加入量按照每g淀粉类物质100—300U淀粉类物质的生物酶进行确定;

步骤2,待反应结束后,向反应溶液中加入葡萄糖淀粉酶,按照每g淀粉类物质加入1000—3000U的标准加入葡萄糖淀粉酶,50—60℃下水解5—12h,水解后副产物全部水解为α-熊果苷,此时水解后的反应溶液为对苯二酚、葡萄糖、α-熊果苷和酶的混合物;

步骤3,将步骤2水解后的反应液经过超滤膜过滤除酶后,加入酵母菌进行发酵除去反应液中的葡萄糖,再通过微滤和吸附除去杂质;发酵温度为20~35℃,发酵时间为24—48h,选择能够消耗葡萄糖,且不水解α-熊果苷的酵母菌,酵母菌的使用质量为反应液体积的1—10%(w/v,即酵母菌的质量/反应液体积);

步骤4,经步骤3处理后的反应料液通过减压蒸发进行浓缩,至固含量浓度为40~60wt%,通过结晶得到α-熊果苷。

参考文献

[1] α-熊果苷的制备方法. CN105400851A

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