女贞子提取物的药理研究

2020/3/4 7:04:13

背景及概述[1][2]

女贞果实药用,采收成熟果实晒干或置热水中烫过后晒干,中药称为女贞子。性凉,味甘、苦。有滋养肝肾,强腰膝,乌须明目的功效。用于眩晕耳鸣,腰膝酸软、须发早白、目暗不明、耳鸣耳聋、须发早白及牙齿松动等症状。现代医学研究证明,许多慢性疾病包括心血管、胃肠消化、内分泌、新陈代谢、呼吸等方面的疾病以及白内障、衰老和各类癌症等,都与人体内累积过多的氧自由基有关。近年研究发现女贞子及其化学成分具有较强的抗氧化活性,能有效的清除自由基。女贞子提取物中主要的化学成分有三萜类、环烯醚萜苷类、黄酮类、苯乙醇类、氨基酸、多糖、挥发油、花青素等。对女贞子提取物的不同部位体外抗氧化活性研究较多。

制备[1]

女贞子提取物制备(85份女贞子,15份甘草):

药材来源:女贞子和甘草购自安徽亳州中药材市场。

主要试剂:食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司;医药级AB-8大孔树脂购自天津波鸿树脂有限公司;甲醇为HPLC级,购于TEDIA;甲酸为HPLC级,购于TEDIA;色谱 用纯净水为哇哈哈纯净水。

将8.5kg干燥的女贞子成熟果实和1.5kg干燥甘草混合粉碎,用75%乙醇热回流提取(25L×3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到浓缩液(6L);对浓缩液依次用石油醚(6L×3次)、 乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g,正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂(2kg,柱体积1.5L)富集,先用20%乙醇冲洗9个柱体积(12L),再用65%乙醇洗脱9个柱体积(15L),收集65%洗脱液,减压浓缩,喷雾干燥得女贞子提取物浸膏粉约155g。

药理研究[2-4]

刘尚智等人研究了女贞子提取物及不同部位的抗氧化活性,为女贞子的开发应用提供基础。将女贞子用超声提取后,提取物(N1)用D101大孔树脂分离为水洗脱部位(N2)和百分之五十醇洗脱部位(N3),并进行各部位DPPH自由基的清除能力测试。将40只小鼠随机分为N1组,N2组,N3组和对照组,用试剂盒测定小鼠血清MDA含量、SOD和GSH-px酶活性。女贞子提取物N1及分离部位N2,N3均有清除DPPH自由基的能力,水洗脱部位(N2)清除DPPH自由基的能力大大提高。可显著降低血清MDA含量,提高小鼠的血清及组织SOD和GSH-px活力。N2体内外抗氧化活性均最高。女贞子提取物具有体内抗氧化活性,其中含有环烯醚萜苷类和花青素类的N2部位抗氧化能力最强,是良好的天然抗氧化剂。

战美等人探讨了女贞子提取物及其成分对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响及其机制。方法:比较实验组(加入成骨诱导剂和女贞子提取物及成分)、成骨诱导组与空白对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性。茜素红染色鉴定钙结节,qRT-PCR检测骨钙素,LRP6和Runx2的基因表达情况。结果:与成骨诱导组比较,10、100μg/m L的女贞子提取物处理的BMSCs ALP活性分别提高了52.38%和95.23%。20μg/m L特女贞苷、女贞苷G13和油女贞苷处理的BMSCs ALP活性分别提高了59.52%、95.23%和100.04%。20μg/m L 3种成分增加钙化结节数量,提高了骨钙素、Runx2和LRP6 m RNA表达。结论:女贞子提取物及其3种成分可能通过诱导Wnt通路的激活促进BMSCs向成骨细胞分化,是发挥抗骨质疏松活性的主要成分。

张辉探究了女贞子提取物对大强度耐力训练力竭后大鼠肝组织自由基代谢的影响。方法采用溶剂提取法提取女贞子果实中的抗氧化物质;选取8周龄健康雄性大鼠45只,随机分为安静组、运动组、实验组各15只。3组大鼠注射生理盐水或女贞子提取物后,运动组和实验组大鼠进行递增大强度耐力跑台训练6 w,运动结束后处死大鼠,取其肝脏组织;采用黄嘌呤氧化酶法检测大鼠肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,Fe2+与菲啉类物络合法检测大鼠肝组织总抗氧化能力(T-AOC),钼酸铵法检测大鼠肝组织过氧化氢酶(CAT)活性,TBA比色法检测大鼠肝组织中丙二醛(MDA)含量,比色法检测大鼠肝组织乳酸脱氢酶(LDH)活性并进行对比分析。结果经过耐力跑台训练后,实验组大鼠肝组织中SOD、T-AOC、CAT活性显著高于安静组(P<0.05),MDA含量和LDH活性显著低于安静组(P<0.05),运动组大鼠SOD、T-AOC、CAT活性显著低于安静组(P<0.05)。结论女贞子提取物对大鼠肝组织自由基代谢有一定影响。

主要参考资料

[1] CN201510579009.7 一种降血脂的女贞子提取物及其制备方法

[2] 刘尚智,江洪波,张志强.女贞子提取物抗氧化活性研究[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(74):99-100.

[3]战美,邓雪,朱迪,周忠琴,刘艳秋.女贞子提取物及其成分促骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[J].中华中医药杂志,2018,33(07):2803-2806.

[4] 张辉.女贞子提取物对大强度耐力训练力竭后大鼠肝组织自由基代谢的影响[J].中国老年学杂志,2018,38(06):1479-1481.

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