N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸性质、用途与生产工艺
4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种重要的氢离子缓冲剂,其在pH为6.8~8.2的范围内具有良好的缓冲能力,能较长时间控制恒定的pH。使用浓度为10~50mmol/L,一般培养液内含20mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸即可具有良好的缓冲能力,且对细胞无毒性作用。
(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L.
(2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l
mol/L(100 x)hepes缓冲液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN
NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.
HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)是一种非离子两性缓冲液,具有高度极性,对多种化学试剂和酶呈惰性,不参加和不干扰生物化学反应的过程,对酶化学反应等无抑制作用,因此可专门用于对细胞器和极易变性的、pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。
直接使用1,2-二氯乙烷作为溶剂,在装有机械搅拌、温度计的100mL的三口瓶中加入羟乙基哌嗪(5.00g,0.02mol),碳酸钾K2CO3(6.00g,0.04mol),50mL1,2-二氯乙烷,油浴加热90℃(1,2-二氯乙烷沸点85℃),搅拌反应20h。停反应,过滤,用200mL乙酸乙酯(EA)洗涤滤出的盐。滤液旋干,得2.6gHEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)固体。
用途
生物缓冲剂;分离与分析RNA核组分的反应缓冲液、预杂交缓冲液、杂交缓冲液;用于RNA与T4RNA
用途
分子生物学级用于用T4 RNA连接酶进行RNA3' -末端标记,分离与分析核RNA之反应缓冲液组分、预杂交缓冲液缓和杂交缓冲液成分
用途
细胞-细胞黏附,细胞短期聚集培养,清洗组织、细胞所用缓冲液
用途
用作生化试剂
N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸
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