小鼠睾丸间质细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- Mouse Leydig cells
- 英文别名:
- Mouse Leydig cells
- 中文名:
- 小鼠睾丸间质细胞
- 中文别名:
- 小鼠睾丸间质细胞;小鼠睾丸间质细胞细胞
- CBNumber:
- CB25524255
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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小鼠睾丸间质细胞性质、用途与生产工艺
小鼠睾丸间质细胞是取自小鼠睾丸间质的上皮细胞样贴壁细胞,小鼠睾丸间质细胞在LH作用下cAMP产量升高,但对促卵泡激素没有响应。小鼠睾丸间质细胞对LH的响应持续时间与血清批次有关;在LH存在下,小鼠睾丸间质细胞可以代谢胆固醇。生长培养基:DMEM/F12+5%HS+2.5%FBS+1%P/S,培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%,温度:37℃。
1)冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM
EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10S的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
小鼠睾丸间质细胞
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