WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- WPMY-1 human normal prostate matrix immortalized cells
- 英文别名:
- Human WPMY-1;WPMY-1 human normal prostate matrix immortalized cells
- 中文名:
- WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞
- 中文别名:
- WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞
- CBNumber:
- CB75526830
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞性质、用途与生产工艺
WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞与RWPE-1 cells(ATCC CRL-11609)一样，来源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。
WPMY-1通过一个pRSTV质料结构，用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。WPMY-1细胞，与RWPE-1细胞及其它上皮细胞衍生株一样，属于来源于同一个前列腺的一系列细胞株。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基；优质胎牛血清，5%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞
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