WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞
中文名称 | WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞 |
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中文同义词 | WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞 |
英文名称 | WPMY-1 human normal prostate matrix immortalized cells |
英文同义词 | WPMY-1 human normal prostate matrix immortalized cells;Human WPMY-1 |
CAS号 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS号 | |
相关类别 | 感受态;细胞系-human细胞系 |
Mol文件 | Mol File |
结构式 |
WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞 性质
WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞与RWPE-1 cells(ATCC CRL-11609)一样,来源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。
WPMY-1通过一个pRSTV质料结构,用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。WPMY-1细胞,与RWPE-1细胞及其它上皮细胞衍生株一样,属于来源于同一个前列腺的一系列细胞株。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;优质胎牛血清,5%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。