佐剂

佐剂又称免疫佐剂，是指所有和抗原一起注射或预先注射，能增加机体对抗原的免疫应答或改变应答类型的一类物质。免疫佐剂的作用：
①能使弱抗原物质增强抗原性；
②增加特异性循环抗体水平，或产生有效的保护性免疫；
③改变所产生的循环抗体类型；
④增强细胞介导的超敏反应能力；
⑤保护抗原(特别是DNA、RNA)不受体内酶的分解。
佐剂对某些分子量小的多糖或多肽抗原性微弱的物质，尤能增强其产生特异性反应的作用。
卡介苗、细菌内毒素、百日咳菌都有佐剂作用。佐剂与某些组织抗原混合注射，易引起变态反应及自身免疫性疾病。实验室常用的佐剂是弗氏佐剂，它可分为：
①不完全弗氏佐剂，由1～6份石蜡油和1份羊毛脂经充分混合而成；
②完全弗氏佐剂，在不完全弗氏佐剂中，于使用前添加灭活的卡介苗(2～20mg/ml)混合而成。实验动物在首次注射抗原时，所使用的抗原通常与完全弗氏佐剂混和，而在以后作再次强化注射时，则只需与不完全弗氏佐剂混和即可。
佐剂与抗原以1：1比例混和，待充分乳化直至静置后不发生油水分离时即可用以注射动物。
【佐剂对抗原的作用】
①增加抗原的表面积。佐剂吸附抗原后增加抗原的表面积，并且改变活性基因的构型， 因而增强抗原的免疫原性。对小分子量可溶性抗原或半抗原，经胶体颗粒吸附后，可提高抗体产量。②增强T和B细胞的协同作用。佐剂和抗原被巨噬细胞吞噬，对抗原加工处理，赋予较强的免疫原性，促进T淋巴细胞免疫力，并加强T淋巴细胞与B淋巴细胞的协同作用。③延长抗原在组织内的贮存时间使抗原降解和释放缓慢。佐剂可引起局部肉芽肿，延长抗原在局部组织内的贮存时间，减慢抗原的降解速度，使抗原缓慢释放。例如短小棒状杆菌所造成的滞留观象远比可溶性抗原持久。前者可长达几星期，后者仅2～3天。接种此菌后局部可引起肉芽肿，但不发展为上皮样细胞与多核巨细胞，也不引起局部组织坏死。氢氧化铝胶与抗原混合后，抗原吸附在铝胶表面，能延长抗原在体内存在的时间，并缓慢释放抗原，提高血中抗体的浓度，并可减少免疫接种次数。
【佐剂对机体的作用】
①引起细胞浸润。佐剂能引起细胞浸润，出现巨噬细胞、淋巴细胞及浆细胞聚集，促进这些细胞增殖，发挥更大的作用。例如注射FCA后，从组织切片可见，注射局部有巨噬细胞、上皮样细胞以及淋巴细胞和浆细胞聚集成团。②加速淋巴细胞的转化。佐剂能加速淋巴细胞转化成为效应细胞，生成更多的致敏淋巴细胞及转变成为浆细胞产生抗体。③膜和胞浆的变化。淋巴细胞被配体刺激后，膜上的磷脂被酶激活，使膜上或邻近的部位发生膜运动及合成新的膜。随之在胞浆和细胞核中也要出现相应的改变，胞内AMP和GMP浓度的升降，起着重要的调节作用和影响。巨噬细胞经佐剂作用后，也出现类似的改变，主要表现为膜活性增加和分泌辅助性因子。④细胞功能的改变。巨噬细胞被佐剂刺激和激活后，出现的主要变化，包括数量增多，膜表面积增大，产生大量辅助因子和前列腺素等调节因子。T和B细胞受佐剂作用后，最大的改变是细胞数目增多，进入细胞增殖周期，膜表面成分发生改变，产生大量辅助因子(LK)。B细胞则分化为浆细胞，并分泌大量的抗体。
【矿物油佐剂】
矿物油佐剂是以符合药用标准的轻矿物油(商品名称白油)，加乳化剂再与适当比例的水溶液抗原混合，经乳化而成的乳剂型疫苗。“乳剂”是将一种溶液分散成细小的微粒，混悬于另一种不相溶的液体中所成的分散体系。被分散的物质称为分散相(内相)，承受分散相的液体称连续相(外相)，两相间的界面活性物质称为乳化剂。当以水为分散相，以加有乳化剂的油为连续相时，制成的乳剂为油包水型乳剂(水/油型或W/O型)，反之为水包油型乳剂(油/水型或O/W型)。W/O型乳剂疫苗佐剂活性较高，但性状较粘稠，注射于动物机体不易分散。O/W乳剂的性状虽较稀，但佐剂活性很低。为此可将W/O型乳剂疫苗，再加2%吐温-80生理盐水搅拌使成双相乳剂型，即水—油—水型或称多型乳剂。双相型乳剂疫苗粘度低，注射后易于分散，局部反应轻微，佐剂效应亦良好。