背景及概述[1]
酸性蛋白质是一种含酸性氨基酸多的蛋白质。不同的氨基酸带有不同化学性质的侧链基团，有的带有碱性侧链，有的带有酸性侧链，由此组成的蛋白质具有不同数目的碱性基团和酸性基团，这些基团会使蛋白质在不同pH溶液中带有不同的净电荷，整个蛋白质分子带正电荷多，即为碱性蛋白（等电点偏向碱性）；整个蛋白质带负电荷多，即为酸性蛋白质（等电点偏向酸性）。酸性固绿染色液是利用酸性蛋白质与带有正电荷的酸性染料固绿结合进行染色，细胞中含量最为丰富的酸性蛋白质主要存在于细胞质和核仁中，因此染色后细胞质和核仁大部分被染成绿色。酸性固绿染色液仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成[1]
操作步骤[1]
- 取新鲜鲜血1滴滴于在破片一端，推片，室温晾干。
- 涂片浸入70%乙醇中固定5分钟，室温晾干。
- 涂片浸入酸性分子分化液中，60℃水浴30分钟。
- 水充分水洗，滤纸吸取残留水分。
- 涂片浸入酸性固绿染色液染色5-15分钟，
- 流水冲洗，室温晾干。
- 直接镜检或滴加1滴中性树胶，加盖盖破片进行封片观察。
注意事项[1]
- 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。
- 血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。
- 酸性分化液孵育后，冲洗应彻底，否则会干扰固绿的染色。
- 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，不复杂。
- pH值对染色有一定影响，在破片应清洁，无酸碱污染，以免影响染色效果。
主要参考资料
[1]酸性固绿染色液操作说明