背景[1-3]
中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)由AS-BI染色液、FBB染色液、核固红染色液组成专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色。中性粒细胞碱性磷酸酶染色液（NAP）不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法（又称同时偶联法），其原理是在PH 9.2-9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸和萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液专门用于血液或骨髓细胞涂片中中性粒细胞碱性磷酸酶染色，结果较金属盐沉淀法可靠。
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AS-BI磷酸盐水解，释放出磷酸与萘酚，后者与偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。该染液专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。
应用[4][5]
用于中性粒细胞碱性磷酸酶活性在发热待查诊断中的价值研究
患者发热时均常规进行血NAP活性检测,分组配对分析,其中感染组患者同时进行白细胞计数(WBC)、中性粒细胞分类计数(NC)、血沉(ESR)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的检测,结果进行差异及相关性分析;同时选取2014年9月1日到2016年10月30日期间发热待查患者180例,对其骨髓片行NAP染色,并对结果进行比较分析。结果:NAP活性检测结果在外周血和骨髓涂片中具有良好的相关性。在感染组中,细菌、真菌感染亚组,NAP活性明显高于病毒、结核、不典型病原体感染组,P<0.01;各炎症指标的阳性率比较:hs-CRP最高,NAP和ESR次之,WBC和NC相对较低,P<0.01,其中NAP与hs-CRP呈低中度相关,与ESR、WBC、NC无明显相关性;在结缔组织病组中,成人斯蒂尔病NAP活性最高,明显高于动脉炎、血管炎、类风湿性关节炎,P<0.01;类风湿性关节炎NAP活性最低,但与其他结缔组织病亚组比较,差异无统计学意义,P>0.05;在血液系统疾病组中,骨髓受侵犯的B细胞淋巴瘤患者NAP活性降低,骨髓未侵犯者NAP活性升高;骨髓未侵犯的淋巴瘤中,B细胞淋巴瘤NAP活性增高较T细胞淋巴瘤明显,P<0.01。慢性粒细胞白血病NAP活性较其他慢性骨髓增殖性疾病明显减低,P<0.01。结论:NAP活性检测结果在血和骨髓中相关性良好,在发热待查诊断和鉴别诊断中具有一定的指导意义。
参考文献
[1]Recombinant Human Tissue Non-Specific Alkaline Phosphatase Successfully Counteracts Lipopolysaccharide Induced Sepsis in Mice[J].B Bender,M Baranyi,A Kerekes,L Bodrogi,R Brands,P Uhrin,Z B?sze.Physiological Research.2015(5)
[2]Alkaline Phosphatase:An Overview[J].Ujjawal Sharma,Deeksha Pal,Rajendra Prasad.Indian Journal of Clinical Biochemistry.2014(3)
[3]Application of Intracellular Alkaline Phosphatase Activity Measurement in Detection of Neutrophil Adherence In Vitro[J].Katarzyna Bednarska,Magdalena Klink,Zofia Sulowska.Mediators of Inflammation.2006
[4]The association of leukocyte count,fibrinogen and c-reactive protein with vascular risk factors and ischemic vascular diseases[J].Armin J Grau,Florian Buggle,Heiko Becher,Egon Werle,Werner Hacke.Thrombosis Research.1996(3)
[5]王倩.中性粒细胞碱性磷酸酶活性在发热待查诊断中的价值[D].浙江大学,2017.