背景及概述[1]
Diff-Quik 染色是在 Wright 染色基础上改良而来的一种快速染色方法,是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液采用世界卫生组织(WHO)推荐的快速染色方法而配制,与 Wright Stain 类似都是利用 Romanowsky Stain 技术原理改良而来的,染色结果与瑞氏染色液也极其相似,但迪夫快速染色所需的时间极短,一般 90s 以内即可完成染色。迪夫快速染色液含固定液,主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片。Diff-Quik 染色非常适合用于批量浸染,且背景清晰无沉渣。
操作步骤[1]
1. 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,自然干燥或酒精灯火焰处理或 Diff-Quik Fixative 固定 20s。
2. Diff-QuikⅠ 染色 5~10s(上下提动玻片 2-3 次,使染液均匀分布),立即取出。
3. Diff-QuikⅡ 染色 10~20s(上下提动玻片 2-3 次,使染液均匀分布),立即取出。
4. 水洗后立即趁湿在显微镜下观察。
5. 将观察后认为有价值的片子带回实验室,用二甲苯透明,封固、保存。
注意事项[1]
1. Diff-Quik Fixative 是 Diff-Quik 专用固定液,如使用量大,可用甲醇替代。
2. 血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
3. 血细胞涂片染色要求新鲜全血或 EDTA 抗凝血。
4. 骨髓涂片染色要求制备好的涂片在空气中快速摇动或扇干,以防止细胞皱缩变形或因空 气潮湿
而溶血,不能用高温或火烤来干燥涂片。
5. 阴道分泌物涂片染色要求新鲜标本涂片后,尽快以火焰或酒精固定,以免细胞变形。
6. 脱落细胞涂片固定可采用自然干燥或固定液固定。
7. 涂片染色中请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
8. 染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
9. 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,不复染。
10. 如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
11. pH 值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
主要参考资料
[1] 迪夫快速染色液(Diff-Quik Stain)说明书