背景及概述[1]
酸性α乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)又称非特异性酯酶染色液，其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚，α-萘酚再与六偶氮副品红偶联，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质。酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)对酯酶染色无特异性，可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色，亦可作氟化钠抑制试验。
酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
操作说明[1]
1.血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片入ANAE固定液固定10-15min。
2.水洗5min。
3.入配置好的ANAE孵育液，放入湿盒中，室温避光孵育1h，水洗。
4.入甲基绿染色液复染5-15min，水洗，镜检。
染色结果[1]
细胞质：暗红色/棕色
细胞核：绿色
氟化钠抑制实验[1]
按ANAE抑制剂：ANAE孵育液=1：25的比例，在ANAE孵育液中加入ANAE抑制剂，其余按上述染色法进行。
注意事项[1]
1.血液或骨髓细胞涂片应新鲜，薄厚适宜，一般2天内染色，否则会影响酶的活性。
2.ANAE孵育液易失效或降低阳性程度，即配即用，不宜久置。
3.ANAE孵育液配置后易出现浑浊，但不会影响染色效果。
4.单核细胞为中度阳性至强阳性，对ANAE抑制剂敏感。正常粒细胞呈阴性反应。
5.每次染色时，应有阳性对照。
主要参考资料
[1]酸性Α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)说明书