背景[1-3]
KG-1细胞由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立，骨髓抽自一个59岁的患有红白血病而后又发展成急性骨髓原性白血病的男性白人。KG-1细胞在形态上类似急性髓原白血病，表现为明显的多形化，骨髓母细胞和骨髓细胞占优势。少量细胞是成熟的粒细胞，也有微量的巨噬细胞和嗜曙红细胞。
白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他非造血组织和器官，同时抑制正常造血功能。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。
根据白血病的分化程度、自然病程的长短可分为急、慢性白血病。急性白血病细胞分化停滞在早期阶段，以原始及早幼细胞为主，疾病发展迅速，病程数月。慢性白血病细胞分化较好，以幼稚或成熟细胞为主，发展缓慢，病程数年。按病变细胞系列分类，包括髓系的粒、单、红、巨核系和淋巴系的T和B细胞系。临床上常将白血病分为淋巴细胞白血病、髓细胞白血病、混合细胞白血病等。
应用[4][5]
用于植物多酚提高CD34~+早期急性髓系白血病细胞被活化免疫细胞杀伤的敏感性研究
白血病在机体的发生历经了免疫监视、相互对抗和免疫逃逸的免疫选择和编辑过程,因此白血病细胞能通过基因突变等多种机制逃逸机体的免疫监视,尤其是具有强大增殖能力的白血病干细胞。逃逸后的白血病干细胞获得克隆性增殖,最终发展成白血病状态。如何限度的清除耐药和免疫抵抗的白血病细胞是降低白血病复发和治愈白血病的关键。近来发现,在食用性植物中,存在着一大类结构不同的化合物——植物多酚,富含该类化合物的食物和饮料消费与癌症低发密切相关。
以含有白血病干细胞的CD34+早期急性髓系白血病KG-1a细胞为靶细胞,采用白藜芦醇和姜黄素2种植物多酚为干预手段,联合细胞因子激活的免疫细胞,以细胞增殖,细胞周期,细胞凋亡,杀伤效率和克隆形成率等指标,观察KG-1a细胞被活化免疫细胞杀伤敏感性的变化,探讨免疫激活物受配体(NKG2D和DNAM1)和外源性凋亡通路(FaS和TRAIL)在该作用中的机制,为有效清除白血病干细胞提供理论和实验依据,为治愈白血病提供新方法。
对CD34+早期急性髓系白血病细胞生物学活性的影响利用细胞涂片,台盼蓝染色细胞计数,流式细胞术和半固体培养法等方法选择含有白血病干细胞的细胞株作为后续的靶细胞。选择白藜芦醇和姜黄素对KG-1a细胞增殖的50%有效抑制浓度,观察细胞形态变化,荧光显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡变化,流式细胞术检测细胞周期和表面标记的变化,半固体培养法检测细胞克隆形成率,分光光度法检测caspase8的活性,比较白藜芦醇和姜黄素对KG-1a细胞生物学活性的影响。
参考文献
[1]Implications of cancer stem cell theory for cancer chemoprevention by natural dietary compounds[J].Yanyan Li,Max S.Wicha,Steven J.Schwartz,Duxin Sun.The Journal of Nutritional Biochemistry.2011(9)
[2]Targeting Cell Signaling and Apoptotic Pathways by Dietary Agents:Role in the Prevention and Treatment of Cancer[J].MuthuK.Shanmugam,Radhamani Kannaiyan,Gautam Sethi.Nutrition and Cancer.2011(2)
[3]TRAIL receptor signaling and therapeutics[J].Junaid Abdulghani,Wafik S El-Deiry.Expert Opinion on Therapeutic Targets.2010(10)
[4]Autophagic degradation of active caspase-8[J].Wen Hou,Jie Han,Caisheng Lu,Leslie A.Goldstein,Hannah Rabinowich.Autophagy.2010(7)
[5]胡亮杉.植物多酚提高CD34~+早期急性髓系白血病细胞被活化免疫细胞杀伤的敏感性[D].南方医科大学,2011.