ANTI-CHOLINE ACETYLTRANSFERASE的应用

2020/9/10 10:11:26

背景[1-3]

ANTI-CHOLINE ACETYLTRANSFERASE是ANTI-CHOLINE ACETYLTRANSFERASE为抗原制得的免疫抗体,可以特异性结合CHOLINE ACETYLTRANSFERASE。主要用于检测CHOLINE ACETYLTRANSFERASE的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

乙酰胆碱转移酶(ChAT)为胆碱能神经元的标志酶,在神经细胞体内合成。经轴浆运输到神经末梢内储存。从大白鼠脑组织提纯的ChAT是一种巯基蛋白质,分子量65,000,对胆碱和乙酰胆碱辅酶A的米氏常数(Km值)分别为4.5X10M,1.1X10M,既ChAT对乙酰胆碱辅酶A较对胆碱的亲和力大。

正常情况下,ChAT的活性较高,其量远超出ChAT合成所需,也就是说ChAT不是ACh合成的限速酶。胆碱乙酰转移酶是一种在神经元胞体内合成的酶。当该转移酶被合成以后,通过轴质流动方式转移到神经轴突末端。其功能是将乙酰辅酶A转移到胆碱上,导致神经递质乙酰胆碱的形成。

乙酰胆碱是调节食道平滑肌运动的主要兴奋性神经递质。食道平滑肌收缩主要是由于乙酰胆碱释放引起,而乙酰胆碱转移酶和乙酰胆碱脂酶分别是Ach的合成酶和水解酶,调节Ach的代谢。食道组织中这两个酶的活力代表了食管内源性胆碱能神经功能状态。乙酰胆碱是延髓脊运动神经元,自主神经系统神经节前纤维,神经节后胆碱能纤维,以及中枢神经系统内许多神经元的主要神经递质。

它是通过胆碱乙酰转移酶的作用,由胆碱与来处线粒体的乙酰辅酶A所合成。在获得释放后,乙酰胆碱刺激特殊的胆碱能受体,这种相互作用很快被局部的胆碱酯酶所终止,后者使乙酰胆碱被除数水解为胆碱与乙酸盐。乙酰胆碱的水平由胆碱乙酰转移酶和胆碱的摄取所控制。

应用[4][5]

用于氯胺酮对新生大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶、乙酰胆碱转移酶的影响研究

探讨氯胺酮对新生大鼠学习记忆能力和海马乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法:80只7d龄SD大鼠,体重12~18g,雌雄不拘,随机分为C、K1、K2、K3组,每组20只。C组单次腹腔注射(i.p.)生理盐水2ml;K1组单次注射氯胺酮80mg/kg i.p.;K2组连续2d给予氯胺酮,80mg/kg.d i.p.,K3组连续3d给予氯胺酮,80mg/kg.d i.p.。

给药过程结束后1d各组处死大鼠10只(首批处死)并立即取左、右脑海马组织以比色法分别观察乙酰胆碱转移酶、乙酰胆碱酯酶表达情况;其余各组大鼠饲养至21d龄采用Morris水迷宫系统观察学习记忆能力改变情况,水迷宫行为测试结束后处死大鼠(27d龄处死),立即取左、右脑海马组织比色法分别观察ChAT、AchE表达情况。大鼠的海马组织ChAT、AchE活力和学习记忆能力变化结果采用统计软件SPSS13.0分析比较。

结果:⑴Morris水迷宫:C组与K1组之间比较、K2组与K3组之间比较差异均无显著性(P>0.05);K2、K3组较C、K1组潜伏期延长且穿越平台次数减少,差异有显著性(P<0.05)。⑵酶测定:首批处死后,C、K1、K2、K3各组间差异有显著性(P<0.05)。27d龄处死,C组与K1组之间比较、K2组与K3组之间比较差异均无显著性(P>0.05);K2、K3组较C、K1组差异均有显著性(P<0.05)。

参考文献

[1]Predictors of Cognitive Dysfunction after Major Noncardiac Surgery[J].Terri G.Monk,B Craig Weldon,Cyndi W.Garvan,Duane E.Dede,Maria T.van der Aa,Kenneth M.Heilman,Joachim S.Gravenstein.Anesthesiology.2008(1)

[2]Postoperative Cognitive Dysfunction in Older Patients with a History of Alcohol Abuse[J].Judith A.Hudetz,Zafar Iqbal,Sweeta D.Gandhi,Kathleen M.Patterson,Trevor F.Hyde,Diane M.Reddy,Anthony G.Hudetz,David C.Warltier.Anesthesiology.2007(3)

[3]Postoperative Cognitive Dysfunction after Noncardiac Surgery:A Systematic Review[J].Stanton Newman,Jan Stygall,Shashivadan Hirani,Shahzad Shaefi,Mervyn Maze.Anesthesiology.2007(3)

[4]The role of nicotinic acetylcholine receptors in Alzheimer’s disease[J].Salvatore Oddo,Frank M.LaFerla.Journal of Physiology-Paris.2006(2)

[5]喻红彪.氯胺酮对新生大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶、乙酰胆碱转移酶的影响[D].安徽医科大学,2012.

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