背景[1-3]
HDAC试剂盒基于荧光检测的HDAC活性分析试剂盒提供了一个快速的、以荧光为基础的方法，淘汰了传统使用的放射/萃取/和/或色谱分析方法。操作仅需2个简单的步骤，可在同一微孔板中进行。首先，HDAC荧光底物（含一个乙酰化的赖氨酸侧链）和有HDAC活性的样本共孵育（如，Hela细胞核提取物或其它）。
底物脱乙酰后激活了底物，随后，赖氨酸显象剂作用后产生荧光团。最终的荧光团很容易用荧光读板仪或荧光计分析。此分析很适合用于高流通量筛选该HDAC活性荧光分析试剂盒可用于哺乳动物组织细胞粗提液、细胞培养上清、尿液、血浆、血清、纯化的蛋白液等生物样本溶液内HDAC的活性检测。
组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases，HDACs）是一类蛋白酶，对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。一般情况下，细胞及有机体内组蛋白的乙酰化和去乙酰化之间存在动态平衡，从而控制染色质的结构和调节基因的表达。在癌细胞中，HDACs的过度表达导致乙酰化作用的增强，通过恢复组蛋白正电荷，从而增加DNA与组蛋白之间的引力，使松弛的核小体变得十分紧密，不利于特定基因的表达，包括一些肿瘤抑制基因。然而，由于缺乏分析HDAC活性的方便工具，筛选抑制HDAC的复合物是较难的。
应用[4][5]
用于组蛋白去乙酰化酶2及白介素17A在慢阻肺及哮喘中的分子机制研究
临床研究发现,慢阻肺和重症哮喘患者中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达水平和活性均显著降低,并可能是导致这些慢性气道炎症患者激素不敏感的重要因素。
新近研究表明,以中性粒细胞反应为主的慢性气道炎症与ThI7密切相关。Th17细胞是一类能分泌IL-17A-F以及IL-22等细胞因子的新型效应CD4+T细胞亚群。临床研究发现,IL-17A的表达水平与哮喘病人的病情严重程度呈正相关,重度哮喘患者血清中IL-17A表达水平较轻、中度患者明显增高,激素抵抗的重症哮喘患者IL-17A的水平与气道中性粒细胞数量呈正相关。Th17相关的炎症因子在慢阻肺患者的气道粘液中表达水平增高。
这些研究表明,Th17细胞在中性粒细胞性气道炎症的分子发病机制中起重要作用。Th17早期分化依赖于IL-1信号途径与IL-6等的联合作用,而在慢性气道炎症中,这些炎症因子的产生可能与HDAC2有关。
HDAC与组蛋白乙酰基转移酶(HAT)两者之间的动态平衡控制着组蛋白的乙酰化水平和染色质的结构,从分子转录水平调控各种炎症基因的表达,从而在慢性气道炎症中起重要作用。HDAC2活性下降增加了组蛋白的乙酰化水平,从而导致NF-κB等转录因子活性增加,相关炎症因子包括IL-6以及pro-IL-1β等表达增高。
参考文献
[1]Human bronchial and parenchymal fibroblasts display differences in basal inflammatory phenotype and response to IL‐17A[J].K.Dessalle,V.Narayanan,S.Kyoh,A.Mogas,A.J.Halayko,P.Nair,C.J.Baglole,D.H.Eidelman,M.S.Ludwig,Q.Hamid.Clinical&Experimental Allergy.2016(7)
[2]IL-17A Is Elevated in Patients With Chronic Obstructive Pulmonary Disease and Contributes to Airway Remodeling by Acting on Fibroblasts[J].Tianwen Lai,Bao-ping Tian,Chao Zhang,Yue Hu,Luanqing Che,Feng Xu,Songmin Ying,Wen Li,Zhihua Chen,Huahao Shen.Chest.2016(4)
[3]Interleukin-17B Antagonizes Interleukin-25-Mediated Mucosal Inflammation[J].Joseph M.Reynolds,Young-Hee Lee,Yun Shi,Xiaohu Wang,Pornpimon Angkasekwinai,Kalyan C.Nallaparaju,Stephanie Flaherty,Seon Hee Chang,Hiroshi Watarai,Chen Dong.Immunity.2015(4)
[4]T c17 cells are associated with cigarette smoke‐induced lung inflammation and emphysema[J].Hongbin Zhou,Wen Hua,Yan Jin,Chao Zhang,Luanqing Che,Lixia Xia,Jiesen Zhou,Zhihua Chen,Wen Li,Huahao Shen.Respirology.2015(3)
[5]赖天文.组蛋白去乙酰化酶2及白介素17A在慢阻肺及哮喘中的分子机制研究[D].浙江大学,2017.