背景及概述[1-2]
成纤维细胞(fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞(mesenchymalcell)分化而来。肺成纤维细胞(lungfibroblast，LF)是体内外研究肺纤维化及其他肺部疾病的主要细胞，原代新生大鼠的肺成纤维细胞由于直接来源于机体组织，生物性状尚未发生较大的变化，能较好反应体内的生长特性，因此广泛用于药理、毒理、药效试验。成纤维细胞培养基FM是专门为正常人类成纤维细胞体外培养设计的最适于其生长的培养基，它是经灭菌的液体培养基，包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(2%)。该培养基缓冲体系为HEPES和重碳酸盐，在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4，该培养基的配方能够选择性的促进正常人类成纤维细胞体外培养中的增殖和生长，并为其达到最理想营养平衡状态提供数量上和质量上的保证。成纤维细胞培养基FM包含500ml基础培养基，10ml胎牛血清5ml成纤维细胞生长添加物和5ml青霉素/链霉素溶液。
存在问题[1]
目前，用于成纤维细胞培养基FM存在的共同问题：①白蛋白作为血清的主要成分，是无血清培养基中普遍的添加成分，由于牛血清白蛋白(BSA)为动物源性蛋白，可能携带致病因子；目前的无动物源性培养基多是采用重组白蛋白(HSA)替代BSA，导致培养基成本较高。②血清中含有多种贴壁因子，依赖血清的细胞在无血清培养时则不易贴壁，所以在无血清培养贴壁细胞时，需要提前包被贴壁因子，增加了操作的复杂性，而且常用的贴壁因子(如胶原、多聚赖氨酸、纤连蛋白、层粘连蛋白等)价格昂贵，提高了培养基成本。③多数无血清培养基的使用需给细胞一个适应过程，逐步降低培养基中血清浓度，最终过渡到无血清培养；另外，在用于原代培养时，还需要额外添加2％的血清，使其不成为真正意义上的无血清培养。④无血清培养基传代次数较少，例如，ATCC公司的FibroblastGrowthKitSerum-Free培养基在说明书中明确指出，培养10代之后细胞增殖速率减缓。
制备[2]
一种成纤维细胞培养基FM，由以下成分及其浓度组成：DMEM/F1215.5g/L，重组白蛋白9.5g/L，柠檬酸铁铵2.75mg/L，环庚三烯酚酮5.86μM，硫酸皮肤素0.83mg/L，卵磷脂10.5g/L，黄芪多糖6.85mg/L，胰岛素11.63mg/L，地塞米松0.92μg/L，谷氨酰胺7.32mM，亚硒酸钠5.86μg/L，维生素E13.2mg/L。制备方法：
(1)准确称取DMEM/F12基础培养基干粉，重组白蛋白，柠檬酸铁铵，环庚三烯酚酮，壳聚糖，硫酸皮肤素，卵磷脂，亚硒酸钠和黄芪多糖，溶于43℃900mL超纯水中，搅拌至均匀得溶液I；
(2)将溶液I冷却至16℃后，加入胰岛素，地塞米松和谷氨酰胺，搅拌均匀，用超纯水定容至1L，得溶液II；
(3)将溶液II用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至7.2，得溶液III；
(4)将溶液III用0.2μm滤膜正压过滤除菌，即得。
参考文献
[1]成纤维细胞培养基FMFMFM使用说明
[2]CN201611210539.5一种成纤维细胞培养基FM及其制备方法