背景[1-3]
人卵巢成纤维细胞分离自卵巢组织采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。
刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。
细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面，其主要特点和功能：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。
应用[4][5]
用于人上皮性卵巢癌相关成纤维细胞促癌作用的研究
卵巢癌相关成纤维细胞（carcinoma-associated fibroblasts,CAFs）,作为卵巢癌间质微环境中最主要的细胞成份之一,对肿瘤的生长、浸润、转移发挥重要的调节作用,对肿瘤微环境内的其他非肿瘤细胞,如细胞外基质、其他间质细胞也产生重要影响,在维持肿瘤微环境的动态平衡中发挥着重要作用。CAFs是一种有着多种来源的细胞群体,具有广泛的异质性,是各肿瘤研究的热点,人上皮性卵巢癌相关CAFs也需进行深入的研究。
探讨上皮性卵巢癌中癌相关成纤维细胞与临床病理特征间的相关性。
方法：平滑肌肌动蛋白（α-SMA）为CAFs特异性标志物,α-SMA表达的数量与强度可代表CAFs的存在数量,因此采用免疫组化通用型二步法检测45例非癌卵巢组织中α-SMA表达和145例上皮性卵巢癌组织中α-SMA和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达,并分析两者的相关性及其临床意义。
结果：①正常卵巢组织除卵巢间质血管外,α-SMA不表达;在良性肿瘤间质中少部分阳性表达,且表达较弱;而在交界性肿瘤中,α-SMA表达强度介于良性肿瘤和恶性肿瘤之间。而在145例上皮性卵巢癌中,α-SMA均阳性表达,代表阳性的CAFs细胞在癌组织中的分布有3种方式;且Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌间质α-SMA阳性表达强度明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P=0.016）;有淋巴结转移的卵巢癌明显高于无淋巴结转移卵巢癌（P=0.049）。
②正常卵巢组织中MMP-9不表达;而上皮性癌中癌细胞MMP-9阳性率为95.2%（138/145）。MMP-9在Ⅲ～Ⅳ期组明显高于Ⅰ～Ⅱ期组（P=0.028）,有淋巴结转移组强阳性率高于无转移组（P=0.033）。
③α-SMA在上皮性卵巢癌间质强阳性表达与癌细胞MMP-9的表达呈正相关（p=027）。
参考文献
[1]Prognostic relevance of cancer associated fibroblasts in human cancer[J].Janna Paulsson,Patrick Micke.Seminars in Cancer Biology.2014
[2]The PI3K/AKT pathway promotes gefitinib resistance in mutant KRAS lung adenocarcinoma by a deacetylase‐dependent mechanism[J].Victor Jeannot,Beno?t Busser,Elisabeth Brambilla,Marie Wislez,Blaise Robin,Jacques Cadranel,Jean‐Luc Coll,Amandine Hurbin.Int.J.Cancer.2014(11)
[3]The seed and soil hypothesis revisited:Current state of knowledge of inherited genes on prognosis in breast cancer[J].Nuria Ribelles,Angela Santonja,Bella Pajares,Casilda Llácer,Emilio Alba.Cancer Treatment Reviews.2014(2)
[4]Cytoreductive surgery for advanced ovarian cancer[J].Martin Pö,lcher,Oliver Zivanovic,Dennis S Chi.Women’s Health.2014(2)
[5]傅士龙.人上皮性卵巢癌相关成纤维细胞促癌作用的研究[D].南京医科大学,2014.