DNA聚合酶是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶,以DNA为复制模板,将DNA由 5’端点开始复制到3’端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、 dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
应用
耐热DNA聚合酶多应用在PCR技术中。各种耐热DNA聚合酶均具有5’-3’聚合酶活 性,但不一定具有3’-5’和5’-3’的外切酶活性。3’-5’外切酶活性可以消除错配,切平末端; 5 ’ -3 ’外切酶活性可以消除合成障碍。
超嗜热古菌Palaeo coccus pacificus DY20341分离自东太平洋洋中脊热液区, 其基因组测序已经完成。预测一共有2001个开放阅读框,其中78.11%没有确定的生物学功 能。
尽管商业化的DNA聚合酶多种多样,针对不同扩增目的片段所需的特异DNA聚合酶体系仍然是必要的。
本发明的目的是提供一种DNA聚合酶。
本发明所提供的DNA聚合酶,其氨基酸序列如序列表中序列4所示。
本发明的另一个目的是提供一种编码DNA聚合酶的基因。
本发明的又一个目的是提供一种重组表达载体,其多克隆位点上插入有所述的编 码DNA聚合酶的基因。
本发明的再一个目的是提供一种重组菌,其含有所述的重组表达载体。
其中,所述重组菌为大肠杆菌。
所述的DNA聚合酶可在PCR中应用。
本发明的又一个目的是提供一种获得目的基因的方法,所述方法包括如下步骤:
根据目的基因的序列设计引物,
以含有目的基因的DNA片段或基因组DNA为模板,利用所设计的引物和所述的DNA 聚合酶进行PCR,
分离PCR产物获得目的基因。