OCI-LY19 人弥漫大B淋巴瘤细胞系的应用

2021/5/12 16:51:38

背景[1-3]

OCI-LY19人弥漫大B淋巴瘤细胞系于1987年从一名27岁的B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)(弥漫性大细胞淋巴瘤,DLCL,4B期,复发)的女性的骨髓中建立的悬浮生长单圆形细胞系。

该细胞具有4%多倍体的人类超二倍体核型-48(46-52)2 X,-X,+6,+6,+8,t(4;8)(q32;q24),del(6)(q15)x2,r(8),t(14;18)(q32;q21),add(18)(q23)-携带影响IGH-BCL2并置的t(14;18),CD3-,CD10+,CD13-,CD19+,CD20(+),CD37-,CD38+,cyCD79a+,CD80+,CD138+,HLA-DR+;培养基: 80%MEMα(GIBCO 12561-056)+20%FBS。

弥漫大B细胞淋巴瘤是NHL中最常见的类型,几乎占所有病例的1/3。这类淋巴瘤占以前临床上的“侵袭性”或“中高度恶性”淋巴瘤的大多数病例。弥漫大B细胞淋巴瘤正确的诊断需要血液病理学专家根据合适的活检和B细胞免疫表型的证据而得出。

OCI-LY19 人弥漫大B淋巴瘤细胞

细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

应用[4][5]

用于人淋巴瘤细胞株OCI-Ly19生物学特性研究和小鼠模型建立研究

弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是成人淋巴瘤中最常见的病理类型,DLBCL分型对指导疾病的治疗和预后有较大的意义。

探索DLBCL细胞株OCI-Ly19的体外培养条件和生物学特性,肿瘤相关分子的表达及DLBCL动物模型的建立方法。

方法:观察OCI-Ly19细胞生长形态及生物学特性,分析比较不同实验条件对细胞生长的影响,用流式细胞术分析相关抗原表达,将OCI-Ly19细胞皮下接种SCID小鼠,观察肿瘤生长状况及组织学形态。

结果:OCI-Ly19细胞在适当培养条件下生长良好,多数重要的B细胞和肿瘤相关标记物均有不同程度的表达;未经照射的SCID小鼠皮下接种107个OCI-Ly19细胞,成瘤率75%,组织学特征符合人类DLBCL的特点。

结论:获得了OCI-Ly19细胞株体外培养的条件及相关免疫标志物表达情况。成功构建了人DLBCL的小鼠模型,为进一步进行相关研究提供了实验基础。

参考文献

[1]The rGel/BLyS Fusion Toxin Inhibits Diffuse Large B-cell Lymphoma Growth In Vitro and In Vivo[J].Mi-Ae Lyu,Deepak Rai,Kwang Seok Ahn,Bokyung Sung,Lawrence H.Cheung,John W.Marks,Bharat B.Aggarwal,Ricardo C.T.Aguiar,Varsha Gandhi,Michael G.Rosenblum.Neoplasia.2010(5)

[2]The overexpression of c-met as a prognostic indicator for gastric carcinomacompared to p53 and p21 nuclear accumulation[J].Uta Drebber,Stephan Baldus,Britt Nolden,Guido Grass,Elfriede Bollschweiler,Hans Dienes,Arnulf H?lscher,Stefan M?nig.Oncology Reports.2008(6)

[3]Treatment with an HLA-peptide and cyclosporine a prolongs rat small bowel allograft surgival[J].I.E Willetts,P.K.H Tam,P.J Morris,M.J Dallman.Journal of Pediatric Surgery.1997(3)

[4]The mouse mutation severe combined immune deficiency(scid)is on chromosome 16[J].G.C.Bosma,M.T.Davisson,N.R.Ruetsch,H.O.Sweet,L.D.Shultz,M.J.Bosma.Immunogenetics.1989(1)

[5]南英,韩香萍,路玲玲,向荣,汪洋.人淋巴瘤细胞株OCI-Ly19生物学特性研究和小鼠模型建立[J].医学研究生学报,2012,25(08):793-797.

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