背景[1-3]
人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA KIT用于体外检测样本中人生长激素释放因子(GH-RF)的含量，主要用于人生长激素释放因子(GH-RF)表达研究。
人生长激素释放因子(GH-RF)
ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。
滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。
操作步骤
1.从室温平衡30min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
应用[4][5]
用于GHR、IGF-1、雌激素受体基因多态性与生长代谢的相关性研究
生长激素受体基因多态性与肥胖相关指标的研究目的了解生长激素受体基因（GHR）外显子3的多态性与体重指数BMI及代谢相关指标如空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数、胰岛素抵抗指数等的相关性。
方法1.肥胖超重者409例、正常对照组206例,测定各研究对象的身高、体重,采用IOTF标准评定肥胖程度,抽取外周血检测空腹血糖、胰岛素、总胆固醇、甘油三酯,稳态模型评估法计算胰岛素敏感性指数、抵抗指数。
2. 抽提外周血基因组DNA,PCR法扩增生长激素受体（GHR）外显子3的基因型。
3. EXCEL软件建立数据库,SPSS12统计软件分析三种基因型的分布频率以及外显子3多态性与肥胖相关指标的相关性。
结果:肥胖超重组与正常对照组的GHR外显子3的多态性比较:肥胖超重组的GHR三种基因型d3/d3、f1/d3、f1/f1分布频率分别为7.3%、27.9%、64.8%;正常对照组三种基因型d3/d3、f1/d3、f1/f1分布频率分别为4.8%、17.5%、77.7%,肥胖超重组的d3基因明显高于对照组（χ2=10.66,p=0.005）。
GHR外显子3的多态性与肥胖超重组代谢指标间的关联分析:将d3/d3和f1/d3合并为一组,与f1/f1进行比较。d3/d3、f1/d3组共有144例,占35.2%;f1/f1有265例,占64.8%。d3/d3、f1/d3组与f1/f1组在年龄（t=-0.21,p=0.83）、体重（t=1.73,p=0.17）、身高（t=0.20,p=0.84）、性别构成（μ2=0.11,p=0.74）上没有差异;d3/d3,f1/d3组在BMI（t=-2.4,p=0.02）、空腹血胰岛素（t=-2.91,p=0.004）、甘油三酯（t=-2.16,p=0.032）、总胆固醇（t=-2.34,p=0.02）、胰岛素抵抗指数（t=-5.11,p=0.00）均明显小于f1/f1组,d3/d3、f1/d3组胰岛素敏感性指数高于f1/f1组（t=-4.37,p=0.00）;两种基因型的空腹血糖值没有差异（t=0.74,p=0.46）。
参考文献
[1]A novel mutation in the human aromatase gene:Insights on the relationship among serum estradiol,longitudinal growth and bone mineral density in an adult man under estrogen replacement treatment[J].Fabio Lanfranco,Lucia Zirilli,Matteo Baldi,Elisa Pignatti,Ginevra Corneli,Ezio Ghigo,Gianluca Aimaretti,Cesare Carani,Vincenzo Rochira.Bone.2008(3)
[2]Human models of aromatase deficiency[J].Lucia Zirilli,Vincenzo Rochira,Chiara Diazzi,Giovanni Caffagni,Cesare Carani.Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology.2008(3)
[3]Influence of Growth Hormone（GH）Receptor Deletion of Exon 3 and Full-Length Isoforms on GH Response and Final Height in Patients with Severe GH Deficiency[J].The Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism.2008(3)
[4]Polymorphisms Identified in the Upstream Core Polyadenylation Signal of IGF1 Gene Exon 6 Do Not Cause Pre-and Postnatal Growth Impairment[J].Debora C.Coutinho,Rocio R.D.Coletta,Elaine M.F.Costa,Paulo R.Pachi,Margaret C.S.Boguszewski,Durval Damiani,Berenice B.Mendonca,Ivo J.P.Arnhold,Alexander A.L.Jorge.The Journal of Clinical Endocrinology&Metabolism.2007(12)
[5]高玲玲.GHR、IGF-1、雌激素受体基因多态性与生长代谢的相关性研究[D].复旦大学,2009.