背景[1-3]
脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体是一类可以特异性结合脱氧胸苷酸激酶DTYMK蛋白的多克隆抗体，主要用于检测脱氧胸苷酸激酶DTYMK蛋白的免疫学实验。
脱氧胸苷激酶又称胸昔激酶。催化脱氧胸营磷酸化形成胸昔一磷酸。胸苷激酶(Thymidine kinase)是一种催化胸苷的磷酸化生成胸苷一磷酸的酶。胸苷激酶以醇基为受体催化ATP，也可以α-uridine为受体。催化α-GAT的磷酸基为供体的酶反应。
脱氧胸苷酸激酶
由于TK1（细胞质胸苷激酶）与细胞增殖密切相关，1980s就出现了检测TK1活性的试剂盒，用于肿瘤辅助诊断和肿瘤治疗监控。1990s后期，基于TK1浓度检测的试剂盒问世，在一定程度上解决了活性检测对于实体瘤灵敏度偏低的缺点，同时化学发光法降低了荧光法的污染危害。处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的步。基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地检查出TK1浓度的变化，从而发现恶性增殖风险，为肿瘤的预防提供增殖信息，适用于健康人群的肿瘤预防检测。
临床应用
1、评估放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；
2、评估手术效果：通过比较肿瘤患者手术前后肿瘤细胞的增殖情况，为手术效果评价提供参考；
3、评估肿瘤复发风险：对肿瘤患者手术及治疗恢复期的残留肿瘤细胞的增殖状态进行动态评估，较影像学更早发现复发转移风险；
应用[4][5]
用于酶法合成脱氧胸苷酸和脱氧胸苷三磷酸研究
脱氧胸苷酸和脱氧胸苷三磷酸在医药、食品以及科研方面具有非常广泛的用途。
利用渗透化的共表达胸苷激酶和乙酸激酶全细胞为催化剂,由脱氧胸苷合成脱氧胸苷酸；利用渗透化的共表达胸苷酸激酶和乙酸激酶为催化剂,由脱氧胸苷酸一步合成脱氧胸苷三磷酸。
将来自大肠杆菌的胸苷激酶（TKase）、乙酸激酶（ACKase）和胸苷酸激酶（TMKase）基因重新克隆到大肠杆菌中,构建三种单基因重组菌。利用同尾酶的方法将单基因tk和ack,以及tmk和ack分别插入到同一表达载体pET-28a中,构建可同时表达TKase和ACKase的重组菌p28AT和p28TA,以及同时表达TMKase和ACKase的重组菌pAT和pTA。
在此基础上,进一步将ack\tmk\tk基因以不同顺序克隆到同一质粒,获得可同时表达三种酶的重组菌。所获得的重组菌均可高效的表达出所需蛋白。为增加细胞的渗透性对重组菌进行渗透化处理。
EDTA处理后的重组菌细胞相对较为稳定,酶活损失较少。利用渗透化的共表达全细胞p28AT催化dTR生成dTMP,反应8小时后dTMP的转化率为89%；使用渗透化的全细胞pAT将dTMP直接磷酸化为dTTP,反应4小时后dTTP的转化率达94%。
两种途径均以ATP为反应的能量供体,利用ACKase催化ATP能量再生系统,由乙酰磷酸再生反应所需的ATP,在反应体系中加入微量的ATP即可提供反应所需的全部能量。
参考文献
[1]Biocatalytic approaches applied to the synthesis of nucleoside prodrugs[J].Luis E.Iglesias,Elizabeth S.Lewkowicz,Rosario Medici,Paola Bianchi,Adolfo M.Iribarren.Biotechnology Advances.2015(5)
[2]New biocatalysts for one pot multistep enzymatic synthesis of pyrimidine nucleoside diphosphates from readily available reagents[J].Ana Laura Valino,Adolfo M.Iribarren,Elizabeth Lewkowicz.Journal of Molecular Catalysis.B,Enzymatic.2014
[3]Co-expression of d-glucose isomerase and d-psicose 3-epimerase:Development of an efficient one-step production of d-psicose[J].Yan Men,Yueming Zhu,Yan Zeng,Ken Izumori,Yuanxia Sun,Yanhe Ma.Enzyme and Microbial Technology.2014
[4]Bacterial whole-cell biocatalysts by surface display of enzymes:toward industrial application[J].Jan Schüürmann,Paul Quehl,Gunter Festel,Joachim Jose.Applied Microbiology and Biotechnology.2014(19)
[5]张娇.酶法合成脱氧胸苷酸和脱氧胸苷三磷酸[D].华东理工大学,2016.