背景[1-3]
鸡细胞凋亡抑制因子ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡细胞凋亡抑制因子（IAP）水平。
原理：用纯化的鸡细胞凋亡抑制因子（IAP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入细胞凋亡抑制因子（IAP），再与HRP标记的细胞凋亡抑制因子（IAP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的细胞凋亡抑制因子（IAP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡细胞凋亡抑制因子（IAP）浓度。
鸡细胞凋亡抑制因子ELISA试剂盒
操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
240pg/ml5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
120pg/ml4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
60pg/ml3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
30pg/ml2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
15pg/ml1号标准品150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
应用[4][5]
用于凋亡抑制因子Survivin在膀胱移行细胞癌中表达及其与细胞增殖、细胞凋亡的关系研究
应用免疫组织化学（IHC）法检测膀胧癌组织、正常膀胧组织中的survivin、儿一67、CyclinD:的表达，通过T血el法检测TCC凋亡细胞，研究survivin表达与cyclinD;、儿一67的表达及冗C细胞凋亡之间相关性，以进一步探讨survivin表达在膀胧癌的发生、发展及细胞凋亡与增殖中的作用，并为探讨survivin在TCC的免疫诊断与免疫治疗方面的应用价值提供理论和实验依据。
方法：1、标本取材手术及活检标本的组织，病理科石蜡包埋后常温保存。在病理科进行切片，切片厚度为4 um。重新进行HE染色，并由专人进行病理诊断核实。
2、对10例正常膀胧组织、46例膀胧移行细胞癌中的表达水平进行检测。应用免疫组织化学（IHC）法检测膀耽癌组织、正常膀胧组织中的sur-vivin、Ki一67、eyelinD，在表达，通过TUnel法检测凋亡细胞。利用统计学原理研究survivin表达与cyclinDI的表达及凋亡之间相关性。
参考文献
[1]Global cancer statistics 2018:GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J].Freddie Bray BSc,MSc,PhD,Jacques Ferlay ME,Isabelle Soerjomataram MD,MSc,PhD,Rebecca L.Siegel MPH,Lindsey A.Torre MSPH,Ahmedin Jemal PhD,DVM.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2018(6)
[2]Degradation of Bcl-2 by XIAP and ARTS Promotes Apoptosis[J].Natalia Edison,Yael Curtz,Nicole Paland,Dana Mamriev,Nicolas Chorubczyk,Tali Haviv-Reingewertz,Nir Kfir,David Morgenstern,Meital Kupervaser,Juliana Kagan,Hyoung Tae Kim,Sarit Larisch.Cell Reports.2017(2)
[3]Familial Risk and Heritability of Colorectal Cancer in the Nordic Twin Study of Cancer[J].Rebecca E.Graff,Sren M?ller,Michael N.Passarelli,John S.Witte,Axel Skytthe,Kaare Christensen,Qihua Tan,Hans-Olov Adami,Kamila Czene,Jennifer R.Harris,Eero Pukkala,Jaakko Kaprio,Edward L.Giovannucci,Lorelei A.Mucci,Jacob B.Hjelmborg.Clinical Gastroenterology and Hepatology.2017(8)
[4]Prevention of colorectal cancer:How many tools do we have in our basket[J].Luca Roncucci,Francesco Mariani.European Journal of Internal Medicine.2015
[5]姜泰茂.凋亡抑制因子Survivin在膀胱移行细胞癌中表达及其与细胞增殖、细胞凋亡的关系[D].中国医科大学,2004.